李生军， 张海霞， 冯若飞*

(1.西北民族大学 生物医学研究中心 生物工程与技术国家民委重点实验室，甘肃 兰州 730030；2.西北民族大学 生命科学与工程学院，甘肃 兰州 730030)

在生物制剂生产过程中由于不可避免的细菌污染，导致革兰氏阴性菌细胞壁的脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)成分残留于生物制剂中，这种脂多糖是由革兰氏阴性菌死亡或分解后释放的，又称内毒素[1]。革兰氏阴性菌中最具代表的大肠杆菌由于其具有转化效率高、重组蛋白产率高、易于控制和易于放大等优点，因此，被广泛应用于重组蛋白的表达[2]。然而，大肠杆菌表达的重组蛋白在纯化过程中同时伴随着内毒素的残留，由于机体对残留的LPS有免疫识别作用，在机体内作用于单核巨噬细胞并产生多种细胞因子，适量的细胞因子可激活免疫系统，对机体有益，而过量则可引起机体严重的病理反应，轻微时表现为发热、休克、心率过快，严重时生物制剂中残存的LPS经血液引起致命性败血症，并伴有多器官功能衰竭甚至死亡[3-4]；每年全世界有超过500万人死于败血症，败血症的治疗已成为现代医学的一个严峻挑战，细菌来源的生物制剂从本质上限制了其在人类和其他哺乳动物中的使用[5]。因此，必须对生物制品中的内毒素进行去除或使其达到药品规定的内毒素含量标准后方可使用[5]。目前报道去除内毒素方法根据作用方式主要有超滤法、活性炭吸附法、亲和吸附法、离子交换层析等。

1 内毒素的结构特征

LPS是革兰氏阴性菌细胞膜上的主要结构成分，包被约四分之三的外膜，LPS由多糖O抗原(O-PS)、核心多糖(C-OS)和类脂A(Lipid A)构成[6]。……