殷艺娜，马 敏，芮琳琳，常俊晓

（1南京医科大学附属常州妇幼保健院麻醉科，江苏213003；2南通大学附属医院）

氯胺酮（Ketamine）作为N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体的非竞争性拮抗剂，是既能镇静又能镇痛的全麻药物，广泛应用于产科和小儿外科手术麻醉中[1-2]。婴幼儿处于神经系统发育期，是神经系统最脆弱、最容易受到损害的时期，全身麻醉药是否影响患儿的大脑发育及学习记忆一直是人们关注的热点[3-4]，氯胺酮是否对发育期大脑产生神经毒性作用，是否对婴幼儿远期发育及学习和认知功能产生影响存在较多争议。斑马鱼体外受精胚胎透明、发育快速、繁殖力强，其生长发育过程、组织系统结构与人类有很高的相似性，在基因和蛋白质结构和功能上具有很高的保守性，广泛用于神经发育生物学、神经损伤与退行性变、毒理、肿瘤、其他系统发育及疾病等多方面研究[5]。从20世纪60年代已有学者研究斑马鱼行为学，近20年斑马鱼作为模式动物在发育及药物毒理等领域得到更多的关注和研究[6]。

本研究以斑马鱼为实验动物模型，通过观察其生长发育形态、自由运动、惊恐反射活动和T迷宫等行为学反应，探究不同浓度氯胺酮对斑马鱼胚胎、幼鱼及成鱼的神经毒性作用，为氯胺酮在婴幼儿麻醉中的安全用药提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验动物 AB品系野生型斑马鱼，饲养和繁殖主要参照The Zebrafish Book[7]。光照/黑暗周期控制在14 h∶10 h，室温与水温控制在（28.5±1）℃。在实验前1日下午将7～10月龄成鱼［雌∶雄（1～2）∶2］放入交配缸，用透明隔板将雌雄鱼隔开，实验当天上午9时取走隔板，30～60 min后收集胚胎，挑去死亡（肉眼观察下胚胎发白）鱼卵，系统水清洗2遍后放入含有幼鱼孵化液的培养皿中，置28.5℃孵化箱中孵育。……