李 源，党海舟

(1.汉中市三二0一医院呼吸科，陕西 汉中 723000； 2.空军军医大学第二附属医院胸腔外科，西安 710000)

目前，肺癌是最常见的癌症，也是全球癌症死亡的主要原因[1]。非小细胞肺癌(NSCLC)是指除小细胞肺癌(SCLC)外的肺癌，约占所有肺癌病例的85%，其5年总生存率仅为15%[2],已成为严重危害人类健康和患者生命质量的疾病。因此，探索其发病机制和影响因素，加强预防和干预成为目前急待解决的关键问题。NSCLC的发生、发展和预后与DNA修复突变相关基因[3]、DNA甲基化[4]等表观遗传修饰水平异常有关。而DNA甲基化会导致DNA、染色质以及DNA和蛋白质相互作用的变化，从而引起基因表达发生改变[5]。

GATA4属于转录因子GATA家族，GATA4是调控一些组织特异性表达的关键因子[6]，此外，GATA4可能驱动内胚层特异性分化[7]。研究发现，转录因子GATA4基因功能的丧失与肺癌[8]、浆液性卵巢癌[9]、胃癌[10]、结直肠细胞系和原发性结肠癌[11]等恶性肿瘤密切相关，其可能是肺癌功能丧失的靶点，且GATA4启动子甲基化参与其中[12]。研究发现过表达GATA4会抑制结肠癌细胞的增殖[13]，而GATA4的缺失使恶性胶质瘤细胞的细胞增殖加速，患者生存率大大降低[14]。本文采用人NSCLC细胞系A549细胞研究其GATA4启动子的甲基化和GATA4 mRNA的水平，并加入DNA甲基化抑制剂5-Aza-2′deoxycytidine，观察其GATA4的mRNA水平和细胞的增殖及凋亡情况，以期为临床NSCLC治疗提供可能的靶点。

1 材料与方法

1.1 试剂

人正常肺上皮细胞系BEAS-2B和人NSCLC细胞系A549(均购自美国典型培养物保藏中心)。Genomic DNA试剂盒(宝日医生物技术(北京)有限公司)，DNA重亚硫酸盐处理试……