卢竹阳 沈蕾 陈丹莹 柏宁

三聚氰胺含氮量高，俗称“伪蛋白”，几乎无味，微溶于水，可溶于甲醇、乙酸、甲醛等，经常被用作化工原料，对健康有害，我国明确规定三聚氰胺不是食品原料，也不是食品添加剂，禁止人为添加。“三鹿奶粉”事件影响恶劣，也给食品检验机构敲响警钟，三聚氰胺参数在乳品检测中成了必检指标，研究其检测方法尤为重要。

GB/T 22388-2008《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》明确规定，测定三聚氰胺有三种方法，即液相色谱-质谱/质谱法、气相色谱-质谱联用法和高效液相色谱法。前两种方法涉及的仪器高端精密，费用昂贵，后续维护保养较为繁琐，不具备普遍性，本文对高效液相色谱法检测乳粉中三聚氰胺的前处理和色谱条件进行了优化。

一、材料和方法

1.仪器。Agilent-1200高效液相色谱仪（VWD），多功能氮吹仪，高速冷冻离心机，数控超声波清洗器，电子天平（Ⅰ级），固相萃取联用仪，SPE小柱：Poly-Sery MCX，60mg/3mL。

2.试剂。三聚氰胺标样（1.0mg/mL），甲醇、乙腈、正己烷均为色谱纯，柠檬酸、辛烷磺酸钠、氨水、三氯乙酸均为分析纯。

3.样品前处理。（1）提取。准确称取1g乳粉置于50ml具塞离心管中，加入8ml三氯乙酸溶液（1%）和2ml乙腈，超声提取约10min，涡旋提取约10min，9500r/min离心8min，取上清液于50ml离心管中；残渣重复提取一次，合并两次提取液，加入10ml三氯乙酸溶液和饱和的正己烷溶液，涡旋振荡1min，9500r/min离心6min，取下层清液，待凈化。（2）净化。依次用3ml甲醇和5ml水对SPE小柱进行活化和平衡，抽至近干；将待净化的清液转至SPE小柱中，用3ml水和3ml甲醇进行淋洗，抽至近干；用6mL氨化甲醇溶液（5%）洗脱，洗脱液于50℃氮气吹干，残留物用1ml流动相定容，涡旋混合1min，过0.22μm微孔水相滤膜后，供测定。……