过表达脑红蛋白对大鼠脊髓损伤的神经保护作用及其机制
2021-03-20王浩张雄唐宁曼王晓林
王浩,张雄,唐宁曼,王晓林
1.四川省达州市中心医院,四川 达州635000;2.重庆医科大学基础医学院,重庆400016
脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)是一种具有很强破坏性的损伤方式,可导致伤者损伤下方的感觉和运动功能完全丧失。SCI 后,机体存在原发性和继发性的损伤机制。原发性损伤是由于损伤直接导致脊髓水肿、白质内轴突纤维连续性中断和神经元立即死亡,从而导致难以逆转和恢复的神经系统功能障碍。而继发性损伤则是在原发性损伤后,脊髓经历了一系列的病理变化,如缺氧、活性氧生成、缺血、凋亡、自噬和炎症等[1-2],而这些病理改变是临床治疗干预脊髓损伤的潜在目标[3-4]。
脑红蛋白(neuroglobin,NGB)是一类广泛分布于脊椎动物中枢和周围神经系统的新型携氧球蛋白,其过表达可通过增强低氧感知或低氧反应来保护神经元免受缺血缺氧的影响,还可通过清除NO 或调节活性氧族(reactive oxygen species,ROS)的生成,在包括SCI 在内的多种神经系统疾病中发挥很好的神经保护作用[5-7],但其机制尚不明确[8-9]。本实验在SCI模型大鼠的脊髓损伤部位注射腺相关病毒携带的Ngb基因,观察过表达Ngb 对SCI 大鼠神经功能的影响,并探讨其机制,为临床治疗SCI 提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 质粒 AAV-Ngb和对照AAV-Con 均由山东维真生物科技有限公司设计并构建(将大鼠Ngb基因序列克隆入病毒载体,将携带Ngb的重组质粒、辅助质粒等共转染入HEK293 细胞,72 h 后收获病毒颗粒)。
1.2 实验动物 清洁级雄性成年(5 ~6 周龄)SD 大鼠90 只,体重150 ~200 g,购自重庆医科大学实验动物中心,合格证号:SCXK(渝)2016-0001。……
