许佳慧，俞露，薛毅勇，梁久佳，富锐丽，王莹，李利，刘涵

长春生物制品研究所有限责任公司，吉林 长春130062

中国仓鼠卵巢（CHO）细胞是目前重组蛋白生产中使用最广泛的哺乳动物细胞［1-3］，自2016 年以来，约70%的重组蛋白以及几乎所有FDA 批准的单克隆抗体均由CHO 细胞生产［4-5］。CHO 细胞具有许多优点：首先，由于CHO 细胞可产生与人类相似的翻译后修饰，因此其表达产物更有可能在人类体内具有相容性和生物活性；其次，这些细胞不易被人类病毒感染，从而将用于商业生产的生物安全风险降至最低；此外，最重要的是，这些细胞能够相对容易地转染重组DNA，并将其整合至基因组上（基因组的可塑性），且可快速适应外界环境变化，使其非常适用于大规模的工业悬浮培养，并能够获得可观的产量［4，6］。但与这种极高的基因组可塑性经常并行的是细胞系的不稳定性，表现为在长期培养过程中细胞产量和产品质量的下降［7］。基于此，2006 年发布的《重组制品生产用哺乳动物细胞质量控制技术评价一般原则》要求，表达重组蛋白的细胞进行遗传稳定性分析，FDA 和ICH 也进行了相关规定。因此，对构建的CHO 细胞进行传代稳定性分析，无论对于CHO 细胞系的开发，还是实际的药品研发、生产，均十分必要。

本实验对1 株表达重组人生长激素（recombinant human growth hormone，rhGH）-Fc 融合蛋白的CHO 工程细胞进行传代稳定性分析，旨在确定其在长期培养过程中的生产稳定代次，以指导后续研究和生产。

1 材料与方法

1.1 细胞 表达rhGH-Fc 融合蛋白的CHO 细胞株由长春生物制品研究所有限责任公司细胞因子室构建并保存；……