赵 瑛 陈 波 冉凌云 何建辉 蔡 乐

乙醇是一种常见的成瘾性物质。据世界卫生组织报道，2016年有300多万人因有害使用乙醇而死亡[1]。世界卫生组织的国际癌症研究机构(International Agency for Research on Cancer，IARC)早已将乙醇和其代谢产物乙醛列为人类一类致癌物质[2]。遗传因素在乙醇消耗和成瘾过程中起重要作用。研究较为广泛并且已证实与饮酒行为相关的是ADH2和ALDH2。有研究表示，细胞色素 P450 2E1(CYP2E1)的c2等位基因、五羟色胺1B(5HT1B)受体基因以及脂肪酸酰胺水解酶(fatty acid amide hydrolase，FAAH)C385A位点基因与饮酒行为及乙醇依赖有关[3～5]。本研究选取了上述5种乙醇代谢相关基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)作为研究目标基因，旨在了解乙醇代谢基因在云南省哈尼族、彝族和汉族人群中的分布情况，以及探讨不同民族人群之间的乙醇代谢基因遗传差异与饮酒行为的关系。

对象与方法

1.对象：分别于2016年11月和2019年7月开展两次调查，抽取居住在云南省无直接血缘关系的哈尼族个体268例(男性104例，女性164例)、彝族个体287例(男性176例，女性111例)和汉族个体88例(男性39例，女性49例)，年龄15～87岁，所有研究对象均签署知情同意书。

2.样本DNA提取：在取得调查对象知情同意的前提下，抽取其静脉血5ml，乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA)抗凝。基因组DNA采用北京工程技术天根有限公司合成的血液基因组DNA提取系统试剂盒提取。

3.位点信息及引物序列：引物由上海捷瑞生物工程有限公司合成(表1)。

表1 位点信息及引物序列

4.多重PCR扩增及产物纯化：将合成好的引物用1×TE溶解到浓度为10pmol/μl，将同一种基因的引物加到一起，混匀，离心。……