陈慧颖 马石霞

（西北民族大学 生命科学与工程学院 甘肃兰州 730124）

肠道微生物区系是大多数动物体内不可或缺的组成部分，它影响一系列生物功能，包括生长发育、营养、繁殖、消化、免疫和信息素产生[1,2]。在这些微生物中，细菌是昆虫肠道内微生物群的重要组成部分，其中一些细菌还与其他微生物及其宿主形成共生关系。昆虫的消化道在形态和物理、化学上的性质影响了内源微生物群落结构[3-5]。这类肠道微生物还有待进一步的研究和开发。白蚁幼虫以新鲜或分解的植物材料为食，肠道微生物以具有高度多样性的细菌群落和发酵物为主。

在本研究中，以植物纤维为食的黄翅土白蚁作为昆虫源，用于分离和表征肠道纤维素降解细菌。

1 材料和方法

1.1 收集和解剖

黄翅土白蚁采自河南南阳的地瓜田，保存在装有无菌土壤的塑料容器（200 mL）中。用70%乙醇灭菌的地瓜块茎喂养白蚁。解剖前，将10 只白蚁饥饿24 h 以清理肠道，然后用70%乙醇进行表面灭菌以去除所有污染物。随后，在无菌蒸馏水中洗涤并风干1 min。

1.2 培养基

所有化学品都是购自北京索莱宝生物科技有限公司。营养培养基：3 g 牛肉膏、5 g 蛋白胨、5 g NaCl、20 g 琼脂和1 000 mL蒸馏水。羧甲基纤维素培养基（CMC培养基）：15 g CMC-Na、1 g NH4NO3、1 g 酵母膏、0.5 g MgSO4·7H2O、1 g KH2PO4和蒸馏水1 000 mL。两种培养基经121 ℃灭菌20 min，固体培养基加1.5%琼脂。糖发酵试剂盒购自上海威正翔禹生物科技有限公司。

1.3 纤维素分解细菌的分离和筛选

在无菌条件下切开内脏放入9 mL 无菌蛋白胨水中，涡旋匀浆，并按1：10 进行稀释，然后划线接种于无盐培养基，分离单菌落，再采用营养培养基进行纯种培养。……