小柴胡汤通过TGF-β1/Smad通路改善大鼠肝纤维化

2021-03-17刘世政凌再芹林爱清

中南医学科学杂志 2021年1期

刘世政，凌再芹，林爱清

(山东省胸科医院，山东省济南市250000)

肝纤维化是肝硬化发生发展过程中重要的病理改变，延缓或逆转肝纤维化是防治肝硬化的重要靶点之一。转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)是促进肝纤维化的关键细胞因子，与细胞膜上的受体结合后能够激活细胞内的Smad2、Smad3，进而调节胶原代谢、促进纤维化[1]。有研究报道，多种具有抗纤维化作用的药物能够抑制TGF-β1/Smad信号通路的激活[2-3]。

小柴胡汤是具有护肝作用的经典中药汤剂，出自《伤寒杂病论》，主要成分柴胡、黄芩均具有护肝、抗炎及抗氧化的作用。有相关动物实验报道，小柴胡汤能够改善肝纤维化大鼠的肝功能及胶原纤维堆积[4-5]；细胞实验报道，小柴胡汤含药血清能够抑制肝星状细胞增殖活化、阻碍TGF-β1/Smad信号通路的激活[6]。但是，小柴胡汤是否直接通过TGF-β1/Smad信号通路改善大鼠肝纤维化尚不清楚。因此，本实验以大鼠肝纤维化模型为研究对象，研究小柴胡汤通过TGF-β1/Smad通路改善大鼠肝纤维化的作用及机制。

1 材料和方法

1.1 试剂与仪器

小柴胡汤由本院中药房配置，药液的生药含量为5 g/mL，4 ℃保存备用；四氯化碳购自Sigma公司；Smad2/3激活剂SRI-011381购自MCE公司；天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate amino transferase，AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine amino transferase，ALT)、白蛋白(albumin，ALB)检测试剂盒购自南京建成研究所，透明质酸(hyaluronic acid，HA)、层粘蛋白(laminin，LN)、Ⅲ型前胶原(procollagen Ⅲ，PCⅢ)的酶联免疫吸附试剂盒购自上海西唐公司；RNA提取试剂盒、cDNA第一链合成试剂盒、PCR试剂盒均购自北京康为世纪公司，RIPA裂解液、BCA试剂盒购自北京索莱宝公司，TGF-β1、Smad2、Smad3一抗购自Abcam公司。