王仲秋，耿 莉，李承学，郝希伟

肾母细胞瘤是儿童常见的恶性肿瘤之一，占所有儿童肾脏肿瘤的95%，其发病率约为1/10 万人[1]。临床上，约10%的肾母细胞瘤患者会发生转移或在术后出现复发，预后较差[1]。深入分析肾母细胞瘤的发生和发展机制，对指导临床诊疗具有重要的意义。甲基化转移酶与肾母细胞瘤密切相关，其基因多态性可能影响疾病易感性[2]。甲基转移酶样7B（methyltransferase-like 7B，METTL7B）是甲基转移酶样家族成员之一，其基因位于人类12 号染色体上，编码的蛋白广泛表达于人体各组织。既往研究发现，METTL7B与胶质瘤、甲状腺癌、乳腺癌和非小细胞肺癌的发生和发展有关[3-6]。既往鲜见METTL7B 与肾母细胞瘤相关的研究报道，因此本研究首先检测了肾母细胞瘤组织中METTL7B 的表达情况，并且分析了METTL7B 表达与临床病理特征和预后的关系，随后采用小RNA 干扰技术靶向沉默METTL7B基因，同时探讨其对肾母细胞瘤细胞生物学行为的影响。

1 材料与方法

1.1 细胞、试剂和仪器

人肾母细胞瘤SK-NEP-1 细胞和正常肾上皮细胞系（PCS-400-010、PCS-400-011 和PCS-400-012）均购于中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。用含10%胎牛血清的DMEM 培养液，置于37 ℃、CO2体积分数为5%的培养箱中进行培养，每3 d 换液1 次，当SK-NEP-1 细胞融合度达80%时进行传代。

DMEM 培养液、胎牛血清、Tris/EDTA 修复液和SP 免疫组织化学检测试剂盒购自上海语纯生物科技有限公司。脂质体转染试剂LipoFiterTM购自美国Sigam 公司。兔抗人METTL7B 和GAPDH（内参照）单克隆抗体以及辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG 购自英国Abcam 公司；反转录试剂盒、2×SYBR Green PCR Mastermix 试剂盒、BCA 蛋白定……