杨云洪， 尹朝晖， 张汝一， 颜登国， 徐伟， 赵洋， 李国胜

(贵州医科大学附属医院 肛肠外科， 贵州 贵阳 550001)

肿瘤的发生与异常的细胞增殖、分化以及凋亡密切相关，而细胞周期阻滞是导致细胞增殖抑制的主要原因之一[1-2]，因此当前肿瘤研究的热点主要与细胞周期阻滞相关周期蛋白的研究有关。三氧化二砷(arsenic trioxide，ATO)作为中药砒霜的主要成分，在多种实体瘤的治疗中得到应用，并取得了良好的效果[3-4]。ATO可以通过多种机制发挥抗肿瘤作用，有研究发现下调细胞周期相关蛋白的表达可以阻滞细胞周期，进而抑制肿瘤细胞的增殖，是ATO发挥抗肿瘤作用的重要机制之一[5-6]。小肠癌是一种少见的消化道恶性肿瘤，可供研究临床资料较少，目前国内外未见与ATO抑制小肠癌细胞增殖及其机制的研究报道，因此本实验将ATO与人小肠癌HIC细胞进行体外培养，观察ATO对小肠癌细胞增殖和细胞周期相关蛋白的表达，研究ATO在体外的抗肿瘤作用及机制，现将结果汇报如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1细胞株及主要试剂 0.25%胰蛋白酶、RPMI-1640培养基均购自美国HyClone公司，人小肠癌HIC细胞株由美国ATCC细胞库提供；兔多克隆抗体糖原合成酶激酶-3(glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β)、细胞周期蛋白B1(cyclin B1)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)及骨髓细胞瘤病毒癌基因(cellular-myelocytomatosis viral oncogene，c-Myc)均购自美国Santa Cruz Biotechnology Inc公司，辣根过氧化物酶 (horseradish peroxidase，HRP) 标记的甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH)购于康成生物技术公司，HRP标记的羊抗兔二抗单抗购自Santa Cruz Biotechnology Inc公司，显影液、定影液购于美国柯达公司，聚乙烯二氟(polyvinylidene fluoride，PVDF)膜、ECL-Plus 发光试剂及高效显影胶片均购于美国Amersham 公司。……