吴坤， 马晓琳， 张迎春， 邓思波， 黄敏慧， 吴建伟， 陈峥宏**， 王涛**

(1.贵州医科大学 基础医学院， 贵州 贵阳 550025； 2.贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室， 贵州 贵阳 550025； 3.济南金域医学检验中心， 山东 济南 250000)

抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)是广泛存在于生物体内具有抵抗外界微生物侵害的一类小分子多肽，是生物固有免疫系统的重要组成成分[1-2]。研究发现，AMPs除了具有抑制细菌、病毒等病原微生物作用外，对肿瘤细胞也具有较强的抑制活性[3-6]，而且对机体正常组织细胞的毒副作用较低[7-8]，因此具有抗肿瘤药物开发的潜力。家蝇抗真菌肽-1A (Muscadomesticaantifungal peptide-1A，MAF-1A) 是来源于家蝇幼虫的小分子阳离子活性多肽，由26个氨基酸残基组成[9]。有研究报道，MAF-1A能杀伤真菌、病毒等致病性微生物[10-11]；课题组前期实验研究发现，MAF-1A能对人肝癌HepG2产生抑制作用，且对人正常肝细胞LO2和红细胞无明显毒性作用，具有进一步研究开发的价值[12]。但MAF-1A抑制HepG2细胞的作用机制尚不清楚，本研究旨在探讨MAF-1A对HepG2细胞产生抑杀作用的可能因素，为MAF-1A的开发利用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1细胞株和主要试剂 人肝癌细胞HepG2由贵州医科大学生物工程实验室惠赠；杜氏改良伊格尔培养基(dulbecco's modified eagle medium,DMEM) 及磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline，PBS；美国GIBCO)，胎牛血清(杭州四季青)，活性氧(reactive oxygen species，ROS) 检测试剂盒及Annexin V-FITC试剂盒(北京索莱宝)，细胞周期检测试剂盒及线粒体膜电位检测试剂盒(上海碧云天)。

1.1.2主要仪器 Novo Cyte流式细胞仪(杭州艾森)，H-600-4透射电子显微镜(日本日立高新)，XDS-1B倒置显微镜(重庆光学)，MCO-5M CO2培养箱(日本三洋)及L500台式低速离心机(湖南湘仪)。……