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Capture-SELEX技术筛选β-苯乙胺核酸适配体

2021-03-06糜唯钰吴世嘉王周平

中国食品学报 2021年2期

糜唯钰,段 诺,吴世嘉,姬 华,王周平

(石河子大学食品学院 新疆石河子832003)

β-苯乙胺是一种重要的芳香族生物胺,作为中枢神经系统中神经递质的调节剂,存在于哺乳动物组织中,高浓度的β-苯乙胺会导致β-内啡肽释放,诱导产生去甲肾上腺素,从而引发高血压和偏头痛等症状[1]。在奶酪、巧克力和腌制肉等食品中都存在β-苯乙胺。其潜在的毒性和作为食品质量标记的可能性,有必要对食品中的β-苯乙胺进行检测。对β-苯乙胺检测技术的研究在国内外已经开展多年,目前已建立多种检测方法,其中最主要的是基于分离技术的仪器分析法,例如高效液相色谱(HPLC)[2-5],气相色谱(GC)[6-9]和毛细管电泳(CE)[10-12]等。这些方法可对β-苯乙胺进行精确的定量分析,然而也受到一些因素的限制,如仪器价格昂贵,检测耗时较长以及需要专门技术人员操作等。

核酸适配体(Aptamer)是通过指数富集的配基系统进化技术(Systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX),筛选获得的一种单链寡核苷酸(ssDNA 或RNA),可折叠形成三级结构,该结构可特异性识别并结合靶标。核酸适配体不仅具有与抗体相似的亲和力和特异性,而且还具有其它优点,例如更短的合成时间,更低的制造成本,更少的批次间差异性,更高的可修饰性,更好的热稳定性以及更广泛的目标种类[13-15]。基于此,核酸适配体被广泛用于临床诊断和治疗剂[16-18],食品安全检测[19-21]和环境监测[22-24]等众多领域。

小分子靶标适配体的筛选大都采用在固相材料表面固定靶标分子的SELEX 技术,该技术存在固定操作复杂,固相材料的空间位阻和靶标分子构象可能改变等缺点。……

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