曾 恒，胡尊琪 综述 冯 丹 审校

胰腺癌(pancreatic cancer，PC)是一种常见的消化道恶性肿瘤，位居全球恶性肿瘤致死率第四位[1]。由于其缺乏特异性早期症状和体征，肿瘤灶进展迅速且较早发生局部浸润和转移，PC诊疗效果较差。循环肿瘤细胞(circulating tumor cells, CTCs)定义为由肿瘤原发或转移灶自发脱落或因诊疗操作导致落入外周血液循环的肿瘤细胞[2]；CTCs在计数、表型变化上与肿瘤灶的状态密切相关，众多研究表明正是由于具有干细胞特性的CTCs从肿瘤灶脱落入血液系统而造成肿瘤的远处转移，因此外周血中存留的CTCs在恶性肿瘤的早期诊断、监测疗效、评估预后及指导治疗上有重要价值。

1 循环肿瘤细胞的检测技术进展

CTCs由肿瘤灶释放入外周血后以单个或聚集成团的形式存在，由于细胞微环境的改变，由于失巢凋亡、流体剪切力、免疫细胞杀伤等因素的影响，绝大部分细胞生存期很短，最终在外周血中存活的细胞极少，每毫升外周血仅含1～102个CTCs[3]，因此对检测技术要求极高。

1.1 物理学特征富集法 密度梯度离心法主要基于血液中各种细胞的密度不同，利用分离介质及高速离心分离肿瘤细胞，该方法不受细胞表面标志物的影响，可获得较高检出率，但富集的CTCs纯度较低且活性较弱。膜滤过法主要利用肿瘤细胞尺寸大于非肿瘤细胞的物理学特性分离，大多数研究认为，滤过膜滤孔直径在8 μm时可获得最好滤过效果，该方法能较好地保持肿瘤细胞形态及活性，但并非所有肿瘤细胞直径均大于8 μm且其他细胞直径均小于8 μm，因此该方法的劣势在于富集的CTCs纯度不够[4]。……