张倩倩， 田贵刚， 陈玲华， 杨 鹏， 程振涛*， 陆安法

(1. 贵州省铜仁市万山区饲料监测与药政监察站，贵州万山554200； 2. 铜仁市万山区动物疫病预防控制中心，贵州万山554200； 3. 贵州大学动物科学学院，贵州贵阳550025； 4. 铜仁市动物疫病预防控制中心，贵州铜仁554300)

猪瘟、高致病性猪繁殖与呼吸综合征(又称猪蓝耳病)、猪O型口蹄疫、猪伪狂犬病是猪的重要病毒性疾病[1，2]，一旦猪群感染将给养猪场带来很大的经济损失。为了解贵州省开阳县某养猪场这4种疫病的免疫和感染情况，为防控和净化提供科学依据，特进行实验室血清学抗体检测，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 检测样品采集该猪场的猪血液样品30份，血样凝固后，1 500 r/min离心取上清液至1.5 L离心管中备用(血清必须清亮，无溶血)。

1.2 主要试剂猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪O型口蹄疫病毒、猪伪狂犬病病毒gB、猪伪狂犬病病毒gE、猪口蹄疫3-ABC 酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测试剂盒(均购自武汉科前动物生物制品有限责任公司)。

1.3 方法

1.3.1 抗体检测严格按照相应病毒ELISA抗体检测试剂盒说明书进行。(1)试验前先加入洗涤液重复洗板2次。(2)将稀释好的待检血清、阴性对照、阳性对照各取定量加至抗原包被板中，37 ℃温育。(3)将各孔的废液丢弃，加入洗涤液，重复洗板5次。(4)加入酶标抗体，置于37 ℃温育。(5)重复洗板5次后，每孔加入试剂盒中的显色液A和B，室温条件下避光反应。(6)最后加入终止液，震荡混匀后在酶标仪上测定各孔的D630 nm值。S为检测样品D630 nm值，P为阳性对照平均D630 nm值，N为阴性对照D630 nm平均值。……