梁 冰，罗后宙

(海南省第三人民医院(三亚中心医院)泌尿外科，海南 三亚 572000)

膀胱癌是人体常见肿瘤之一，占中国泌尿生殖系肿瘤发病率的第一位。膀胱癌可发生于任何年龄，甚至于儿童，其发病率随年龄增长而逐渐增加[1-3]。塞来昔布(celecoxib)是一种特异性的Cox-2抑制剂，可调控细胞周期，促进癌细胞凋亡，抑制血管生成[4]。研究发现，塞来昔布可以抑制乳腺癌细胞的能动性和侵袭性，加速乳腺癌MCF-7细胞凋亡[5]。此外，塞来昔布对药物诱导的膀胱癌小鼠模型具有一定的治疗作用[6-7]。但其治疗机制的研究报道较少，因此，本研究观察塞来昔布对膀胱癌小鼠的治疗情况并初步探讨其作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物及试剂

SPF级BALB/c雄性裸鼠60只，体质量15～18 g，周龄3～4周[中国医科大学实验动物中心，动物许可证号：SYXK(辽)2013-0007]。塞来昔布(Pfizer Pharmaceuticals LLC，国药准字J20120063)，人膀胱癌细胞系5637(南京海克尔生物科技有限公司)，人膀胱移行上皮细胞(上海联迈生物工程有限公司)，PMI-1640高糖培养基、二氨基联苯胺(DAB)、细胞总蛋白提取试剂盒、BCA 蛋白浓度测定试剂盒及Western blot检测相关试剂(上海索莱宝生物科技有限公司)，胎牛血清、0.25%胰蛋白酶消化液(Gibco公司)，TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(上海碧云天生物技术有限公司)，兔抗鼠一抗(CD4+、CD8+、COX-2、VEGF及cPLA2)、羊抗兔二抗[赛默飞(上海)世尔科技有限公司]。

1.2 方法

1.2.1 造模： 将60只小鼠随机分为对照组、模型组及观察组，每组各20只。取人膀胱癌细胞系5637细胞培养至良好状态；取模型组及观察组小鼠，在超净台中于小鼠臀部皮下注射生长良好的细胞，每只注射2×106个重悬于100 μL PBS中的人膀胱癌细胞系5637细胞；……