庄 红，张苏川，刘慧地，徐亚宁，黄 璐，代 天，蒋 品

(江汉大学附属医院(武汉市第六医院) 心血管内科, 湖北 武汉 430015)

动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是严重危害人类健康和生活质量的疾病之一，揭示AS发生发展的关键因素，对有效预防和治疗AS具有重要意义[1]。巨噬细胞参与的脂质代谢障碍是AS的病变基础；巨噬细胞泡沫化和凋亡是导致AS斑块不稳定的重要因素；干预巨噬细胞泡沫化和凋亡可对阻止AS进展、防治心脑血管病的发生具有重要意义[2]。氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein，ox-LDL)是AS的重要危险因子，其可以结合巨噬细胞表面的清道夫受体，促进巨噬细胞吞噬ox-LDL，造成脂质积聚，进而形成泡沫细胞[3]。CXC趋化因子配体 12(CXC chemokine ligand 12，CXCL12)是CXC趋化因子家族的成员，又称基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1，SDF-1)，稳定和不稳定的颈动脉粥样斑块中CXCL12的表达增加，且定位在巨噬细胞中[4]。p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinases，p38MAPK)是调控免疫炎性反应最主要的MAPK家族成员之一，可通过调节炎性反应影响AS的进展[5]。本实验旨在研究CXCL12对ox-LDL诱导巨噬细胞泡沫化和凋亡作用及其机制是否与p38MAPK信号通路有关。

1 材料与方法

1.1 材料

小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264.7(上海北诺生物科技有限公司)；胎牛血清和RPMI-1640培养基(Gibco公司)；氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein，ox-LDL)(广州奕源生物科技有限公司)；油红O(Sigma-Aldrich公司)；苏木精(上海源叶生物科技有限公司)；异丙醇(天津市化学试剂三厂)；蛋白提取试剂盒、二辛可宁酸(bicinchoninic acid，BCA)试剂盒和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE)试剂盒(碧云天生物技术研究所)；抗体(Cell Signaling Technology 公司)；膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(annexin V-FITC)和碘化丙锭(PI)试剂盒(南京凯基生物科技发展有限公司)；……