王 英，贝 宁，裴 华，杨 文，王华民

(1.海南医学院 病原生物学与免疫学实验室，海南 海口 571199； 2.海南医学院第二附属医院 检验科，海南 海口 570000； 3.海南省老年病医院 四科，海南 海口 571100)

假丝酵母菌(Candidaalbicans)是最常见的人类机会致病性真菌，容易引起妇女外阴阴道假丝酵母菌病(vulvovaginal candidiasis, VVC)，严重影响着女性的生殖健康和生活质量[1-2]，妊娠期合并VVC还可以增加不良妊娠结局的风险。抗真菌药物治疗虽有效，但耐药问题却日益突出，迫切需要寻找和研发新的抗真菌药物。红树林真菌胞外多糖(exopolysaccharide，EPS)生物学活性具有多样性[3-4]。

在红树林生态系统中，酵母菌群落相对于其他水域呈现出丰富的多样性，其合成的胞外多糖生物学活性可能同样具有多样性。在前期的红树林土壤微生物筛选研究工作中，我们分离到一株真菌PH1008，其产生的胞外多糖具有独特的生物学活性。通过构建小鼠VVC模型后，利用该胞外多糖进行阴道黏膜免疫干预，观察其通过阴道黏膜免疫后是否诱导小鼠机体引发预期的抗白假丝酵母菌感染效应。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物： SPF级，雌性，BALB/c品系小鼠，8～10周龄，体质量24～28 g(湖南斯莱克景达实验动物有限公司，合格证书号：33920Q10866ROM)。

1.1.2 试剂和菌种： 胞外多糖(exopolysaccharide，EPS)(本课题组从真菌PH1008发酵液中提取)；大豆粉玉米粉发酵培养液(本课题组制备)；苯甲酸雌二醇注射液(杭州动物药品厂)；沙氏培养基(广东环凯微生物科技有限公司)；白假丝酵母菌ATCC10231(广东省微生物研究所)。

1.2 方法

1.2.1 EPS的提取： 无菌条件下，将真菌PH1008活化二代后，接种于大豆粉玉米粉发酵培养液中，5 d后取出，收集上清液，用链蛋白酶+Sevage联合法纯化获得EPS。……