刘文杰，吴菡，黄建，周武碧

作者单位：南京医科大学附属淮安第一医院病理科，江苏 淮安223300

胃癌（GC）通常预后较差，目前是全球第四大常见癌症，且是东亚地区最常见的癌症。尽管已提出许多策略来提高病人存活率，但晚期GC 患者的中位存活时间仍为约12 个月。因此，需要更深入的探讨胃癌的分子发病机制，以改进胃癌治疗的新方法。人类表皮生长因子受体2（HER2）属于表皮生长因子受体（EGFR）家族成员，其在细胞生长、分化、存活相关通路中具有重要作用。市面上最常见的人源化的抗HER2 单抗为曲妥珠单抗，其可通过抑制HER2 二聚体、胞内吞HER2 及抗体依赖细胞介导的细胞毒等途径抑制肿瘤的恶化。大量研究报道，HER2 在胃癌患者中的表达异常升高。但是，HER2 对胃癌细胞生物性行为的影响未有研究。2018年11月至2019年6月进行本研究，拟通过检测胃癌细胞中HER2 的表达，探讨过表达HER2、敲减HER2 对胃癌细胞增殖、迁移侵袭及凋亡的影响，旨在揭示HER2在胃癌进展中的作用。

1 材料与方法

1.1 材料

永生化的正常胃上皮细胞GES-1、胃癌细胞SGC-7901、MGC-803、BGC-823均购自美国菌种保藏中心；噻唑蓝试剂（MTT）、胰蛋白酶均购自美国Sellect 公司；Lipofectamine2000、逆转录试剂盒、二喹啉甲酸（BCA）蛋白定量试剂盒购自大连Takara 公司；聚偏二氟乙烯（PVDF）膜购自德国罗氏诊断有限公司；放射免疫沉淀测定（RIPA）蛋白裂解液和电化学发光（ECL）试剂盒均购自碧云天生物技术公司；Matrigel基质胶、Transwell小室购自美国Coming公司；膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V-FITC）/碘化丙啶（PI）凋亡检测试剂盒购自北京索莱宝公司。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养 胃癌细胞SGC-7901、MGC-803、BGC-823以及正常胃上皮细胞GES-1均用含10%胎牛血清的DMEM 培养基进行常规培养（37 ℃，含5%二氧化碳）。……