陈冰霞，张梦欣，韩孟伊，张杰森，李勇森，金晨曦，齐艳伟

(1.广州医科大学 第三临床学院，广州 511436；2.广州医科大学 病原生物学与免疫学教研室，广州 511436)

据WHO报告，2017年全球约有2.19亿疟疾病例，大多发生于撒哈拉以南地区，病死率高，我国经过积极的疟疾消除工作，近几十年来疟疾得到了良好的控制[1]。但境外输入性疟疾成为主要来源，输入性病例不断上升[2]。NK细胞已被证实可抵抗病毒和细胞内寄生微生物感染[3]，B细胞介导的特异性免疫应答和体液免疫应答可保护机体[4-5]，二者均分泌多种细胞因子如IFN-γ、IL-10和IL-2来抵抗感染[6-7]。

青蒿素类药物是治疗疟疾的首选药物，但其有一定的免疫抑制作用[8]，副作用明显，如荨麻疹等[9]，且有些虫株出现了耐药性。由于疟原虫逃避机体免疫作用的途径较多[10]，也给疫苗研发带来了挑战。本研究探讨约氏疟原虫感染中NK细胞、B细胞及其表达的细胞因子的作用，旨在为阐明约氏疟原虫的耐药机制和疟疾疫苗的研发提供新方向。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 研究对象 6～8周龄SPF级雌性C57BL/6小鼠购于广州中医药大学实验动物中心，饲养于广州医科大学实验动物中心；约氏疟原虫(Plasmodiumyoelii)NSM株由厦门大学苏新专博士和李剑博士惠赠。

1.1.2 试剂 Hanks液、红细胞裂解液、PBS购于生工生物工程(上海)股份有限公司；FCS、RPMI 1640基础培养液购于ThermoFisher Scientific 公司；别藻蓝蛋白(allophycocyanin，APC)-Cy7标记的抗小鼠CD19、PB450标记的抗小鼠CD3、藻红蛋白(phycoerythrin，PE)-Cy7标记的抗小鼠NK1.1、FITC标记的抗小鼠IFN-γ、PE标记的抗小鼠IL-12、APC标记的抗小鼠IL-10流式抗体购于Biolegend公司。

1.1.3 实验仪器 CytoFLEX FCM购自Beckman Coulter公司。……