郑乃盛，汪婷婷，袁向亮，沈立松

(上海交通大学医学院附属新华医院 检验科，上海 200082)

在恶性肿瘤治疗中，调节免疫抑制途径实现了主要突破。虽然免疫治疗给肿瘤患者带来了福音，但许多患者仍表现出耐药。有数据显示，免疫检查点抑制剂治疗在筛选的PD-L1阳性胃癌患者中的治疗反应率仅为22.2%[1]。肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophage，TAM)促使胃癌肿瘤微环境成为一个免疫抑制的中心，TAM富集部位T细胞浸润的数量和功能都不足[2]，杀伤性免疫细胞的功能受到抑制[3-4]，这些也促进胃癌细胞的侵袭、转移[5]及上皮间质转化[6]。最重要的一点，TAM与胃癌细胞高表达PD-L1高度相关[7]。这一点提示，TAM与胃癌细胞发生免疫逃逸和免疫治疗耐药有一定联系。近年来研究发现，TAM外泌体对多种肿瘤细胞的生长、转移及耐药有促进作用[8-10]，其中包括胃癌细胞[11-12]。外泌体是直径为100 nm左右的细胞外囊泡，携带多种蛋白和核酸，发挥细胞间交流的生物学作用。综上推测，TAM来源外泌体有促进胃癌细胞产生免疫抑制的潜力。因此，本研究探究TAM外泌体促进胃癌细胞的免疫抑制作用及其产生的原因。

1 材料与方法

1.1 细胞及试剂前胃癌(mouse forestomach carcinoma，MFC)小鼠MFC细胞购自国家实验细胞资源共享平台；THP-1人单核细胞系、BGC-823人胃腺癌细胞购自中国科学院细胞库；DMEM、RPMI 1640、DMEM/F12培养液和FCS均购自Gibco公司。

1.2 M2型巨噬细胞体外模型的构建采用颈部脱臼法处死615品系小鼠(小鼠购自西普尔-必凯实验动物有限公司，饲养于上海交通大学医学院附属新华医院动物实验中心)，取其股骨及胫骨并用注射器吸取DMEM培养液将骨内细胞冲出，直至骨头变白。……