穿龙薯蓣皂苷元对DBA1/J小鼠CD4+CD25-T细胞的影响

2021-03-03梁秀军董永彩田焕娜赵晓菲

承德医学院学报 2021年6期

梁秀军，董永彩，李强，陈萌，田焕娜，赵晓菲

（1.承德医学院，河北承德 067000； 2.承德钢铁集团有限公司职工医院）

调节性T细胞（Treg）是一类具有负向免疫调节功能的CD4+T细胞亚群，对多种自身免疫性疾病有抑制作用[1]。Treg细胞的分子标志通常为CD25，并且特异性表达Foxp3，Treg细胞可以通过分泌IL-10等抑制性细胞因子发挥负向免疫调节作用[2]，CD4+CD25-T细胞则作为效应细胞参与免疫应答。近年来许多研究发现系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿关节炎（RA）等多种自身免疫疾病中Treg细胞比例显著降低[3]。实验结果证实，在体外可用CD4+CD25-T细胞为前体细胞，通过诱导干预，使CD4+CD25-T细胞转化为Treg细胞[4]。

本课题组前期实验结果显示穿龙薯蓣皂苷元可调节CD4+T细胞亚群、减少炎性因子的产生，对类风湿关节炎有一定治疗作用[5]，但具体作用机制仍在进一步研究。本实验以雌激素作为阳性对照药物[6]，通过研究穿龙薯蓣皂苷元对CD4+CD25-T细胞上清中细胞因子IL-10浓度、Treg细胞Foxp3 mRNA水平及Treg细胞比率影响，旨在初步研究穿龙薯蓣皂苷元对CD4+CD25-T细胞转化为CD4+CD25+Treg细胞的诱导作用，为穿山龙治疗RA的开发应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

雄性DBA1/J小鼠，SPF级，30只，7～8周龄，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，许可证号码：SCXK(沪)2012-0002。

1.2 主要试剂

The CD4+CD25+Regulatory T Cell Isolation Kit mouse，德国Miltenyi Biotec公司；CD3单抗、CD28单抗，Biolegend公司；mouse rIL-2，Peprotech公司；雌二醇，Solarbio公司；Mouse IL-10 ELISA Kit，美国Biolegend公司；Mouse Regulatory T Cell Staining Kit #3，美国Ebioscience公司；SYBR Premix Ex TaqTM II 试剂盒、Foxp3引物、GAPDH引物，中国大连宝生物工程有限公司。