赵明旺，张 君，徐尚荣，黄 荣，舒 适，彭 巍，张琳钦

（1.青海大学农牧学院，青海西宁 810016；2.青海大学畜牧兽医科学院，青海西宁 810016）

牦牛是高原地区的全能家畜[1]。在我国，牦牛的需求量大，市场广泛，牦牛养殖业是高原畜牧业经济和西北地区农业生产中不可或缺的组成部分，但受环境等因素影响，牦牛的繁殖能力普遍不高。因此，提高牦牛的繁殖力有助于牦牛产业的发展。

作为生物钟家族的核心成员之一，Bmal1（Brain and muscle arnt-like 1）主要以异源二聚体的形式在哺乳动物生物钟转录、翻译反馈环中起到正调节的作用[2]。研究发现，Bmal1基因能参与哺乳动物生殖生理的调控[3-4]。有研究表明，敲低颗粒细胞Bmal1 可显著降低动物COX2 的表达，从而影响前列腺素的合成[5-6]；Alvarez 等[7]研究发现敲除Bmal1基因后，雌雄小鼠不仅出现不孕不育现象，而且孕激素合成的重要调节蛋白（Star）功能出现降低，导致小鼠类固醇激素合成及分泌减少，影响雌雄鼠的生殖能力。Cyp19a1是雌激素合成的关键基因，参与性激素的合成[8]；Star作为类固醇激素合成的限速酶，主要负责编码的蛋白能够将线粒体外膜的胆固醇转运到线粒体内膜，Star基因是类固醇激素合成的重要基因[9]。关于Bmal1基因的表达对牛繁殖生理的影响鲜有报道。因此，本实验以体外培养的牦牛卵巢颗粒细胞作为研究对象，用siRNA 干扰Bmal1基因的表达，探讨抑制Bmal1基因表达是否对牦牛颗粒细胞激素分泌有所影响，以期为阐明Bmal1基因参与牦牛卵泡发育的分子机制提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 西宁市裕泰屠宰场母牦牛。……