湖北后河国家级自然保护区短萼黄连的分子鉴定与分析
2021-02-25敖智广韦乐华李建斌宋良科茆灿泉
敖智广,韦乐华,杨 蕾,李 栋,李建斌,宋良科,廖 海,茆灿泉
(西南交通大学 生命科学与工程学院,成都 610031)
黄连(CoptischinensisFranch)又名味连、鸡爪连、川黄连等,为多年生草本植物,根状茎黄色,常分枝,密生多数须根;叶基生,坚纸质,卵状三角形,三全裂,中央裂片卵状菱形,羽状深裂,边缘有锐锯齿[1]。由于历史及各地民间用药习惯不同,黄连药材的植物来源比较复杂,涉及中国黄连属植物6个种、1个变种,分别为黄连(C.chinensis)、三角叶黄连(C.deltoidea)、云南黄连(C.teeta)、峨眉黄连(C.omeiensis)、五叶黄连(C.quinquefolia)、五裂黄连(C.quinquesecta)以及短萼黄连变种(C.chinensisvar.brevisepala),其根茎均含有较多的小檗碱而可供药用。目前我国2015版药典收载的药材黄连基源植物是黄连、三角叶黄连以及云南黄连的干燥根茎[2]。市场销售均为人工栽培,罕有野生黄连。短萼黄连作为黄连的变种,传统的形态学、性状、显微和理化鉴定方法,效果和准确性较差。作为湖北后河国家级自然保护区新发现的野生黄连物种,有必要对其进行分子水平的鉴定,以确定其基原物种。
DNA条形码(DNA barcode)分子鉴定技术是利用基因组中一段公认的、相对较短和保守的DNA序列来进行物种鉴定的一种分子生物学技术,该技术几乎不受环境、被鉴定物形态等情况的影响,可以很好地弥补传统鉴定方法的不足[3-4],以ITS2 序列为主、psbA-TrnH序列为辅的中药材分子水平鉴定方式已经被作为中药材DNA条形码鉴定原则的推荐方法之一,具有操作简易、专业技术要求不高、可批量操作、基因序列差异对比更准确,鉴定成功率高等优势[5-6]。……
