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miR-204过表达对喉鳞癌细胞增殖、周期、凋亡及侵袭的影响及机制

2021-02-25罗德艳冯俊彭涛唐一萍杨久梅

山东医药 2021年4期

罗德艳,冯俊,彭涛,唐一萍,杨久梅

川北医学院第二临床医学院·南充市中心医院,四川南充637000

喉癌属头颈部恶性肿瘤,其主要病理学类型为喉鳞状细胞癌(鳞癌),该病早期诊断率低、长期生存率不高,且癌细胞增殖、侵袭是造成治疗失败的重要原因[1]。因此,探索喉鳞癌特异性分子标志物和有效的基因治疗靶点,对喉鳞癌早期诊治、有效治疗尤为重要。近年来研究表明,微小RNA(miRNA)在恶性肿瘤早期诊断、靶向治疗、预后评估等方面有良好应用前景[2]。miR-204 是 miRNA 成员之一,已有研究发现其在肝癌[3]、前列腺癌[4]、胃癌[5]、宫颈癌[6]等多种恶性肿瘤中呈低表达,上调miR-204 表达可抑制细胞增殖、侵袭并促进细胞凋亡。但目前国内外缺乏关于miR-204 与喉鳞癌的研究,并且有待进一步明确其作用机制。因此,2020 年4—7 月,本研究通过观察miR-204 过表达对喉鳞癌细胞生物学行为的影响,以期为喉鳞癌的靶向治疗提供新思路。现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 细胞、试剂及仪器 人喉鳞癌细胞株Hep-2 由华西医学实验中心惠赠;RPMI1640 培养基、胎牛血清购自美国 Hyclone 公司;LipofectamineTM2000、TRIzol 试剂购自美国Invitrogen 公司;逆转录试剂盒、qRT-PCR 试剂盒购自大连宝生物工程有限公司;miR-204 mimics及NC-mimics购自上海吉玛制药技术有限公司;miR-204 及U6 引物购自苏州金唯智生物科技有限公司;细胞凋亡试剂盒购自南京凯基生物技术股份有限公司;CCK8 试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司;一抗高迁移率组蛋白A2(HMGA2)和 GAPDH 抗体均购自美国 Santa Cruz 公司;HRP 标记的二抗购自美国Bioworld 公司;Tran⁃swell 小室购自美国 Corning 公司;基质胶、FACSCali⁃bur 流式细胞仪购自美国BD 公司;……

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