卢阳 陈萍 林素仙 姜建昌 王胜男 张智勇 杨美绿

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种以关节组织慢性炎症性病变为主要表现的免疫性疾病。机体免疫系统改变，特别是细胞免疫异常，在RA发生过程中所起的关键性作用越来越受到重视[1-2]。有研究发现，在RA患者外周调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）的比例明显下降，且存在以分泌IL-17为特征的CD4+T细胞（Th17）细胞增殖，这种Th17/Treg失衡是导致RA炎症和损伤的重要因素[3-4]。既往研究发现，生长停滞特异性蛋白 6（growth arrest-specific 6，Gas6）能促进Treg功能活化（呈浓度依赖性），增强Treg对T细胞增殖的抑制能力[5-6]。此外，缺失Gas6的小鼠Th17细胞显著增殖，呈现出Th17/Treg失衡的现象，导致炎症反应的发生[7]。鉴于Treg在RA发病过程中的关键作用，笔者推测Gas6能够调控RA小鼠Th17/Treg平衡，从而减轻炎症和关节损伤，为此，笔者通过建立胶原诱导的关节炎（collagen induced arthritis，CIA）小鼠模型，探讨 Gas6对Th17/Treg细胞平衡和炎症反应的调控作用。

1 材料和方法

1.1 实验动物及试剂 雄性SPF级DBA/1J小鼠24只（8周龄，体重22～25 g）购自上海斯莱克实验动物有限公司，实验动物生产许可证号：SCXK（沪）2012-0002，饲养于温州医科大学实验动物中心。弗氏完全佐剂（F5881）和弗氏不完全佐剂（F5506）购自美国Sigma公司，牛Ⅱ型胶原蛋白购自美国Chondrex公司（20022）。重组小鼠Gas6购自美国R & D公司（CF 8310-GS-050）。IL-10 ELISA试剂盒购自上海钦诚生物科技公司（QC-IL10-Mu），IL-17 ELISA试剂盒购自联迈生物公（LM-IL-17-Mu）。FITC标记的大鼠抗小鼠CD4抗体（553046）、PE标记大鼠抗小鼠叉头蛋白翼状螺旋转录因子 P3（Forkhead/winged helix transcription factor p3，Foxp3）抗体（560414）和PE标记大鼠抗小鼠IL-17A抗体均购自美国BD公司（561020）。

1.2 实验分组及CIA小鼠模型制备 将小鼠按照随机数字表法分为4组，即对照组、CIA组、CIA+生理盐水组和CIA+Gas6组，每组6只。……