脐动脉血流参数联合血清NLRP3炎症小体预测子痫前期的临床价值

2021-02-11张洪文韩秋峪林小满孙洁芸

中国妇幼健康研究 2021年12期

张洪文，韩秋峪，林小满，孙洁芸

(徐州医科大学附属医院妇产科，江苏徐州 221000)

妊娠期高血压疾病是妊娠期较为常见的并发症，国内该病的发生率为10%左右。妊娠期高血压是由多种病因引起的全身多器官和系统的病变，属于一种综合征[1]。子痫前期是妊娠期高血压疾病较严重的时期，此期孕妇脏器病变更加严重[2]。所以及时对子痫前期的发生风险进行有效评估，对早期发现、预防该病具有十分重要的临床意义。脐动脉血流参数收缩期/舒张期流速比值(S/D)、阻力指数(RI)、搏动指数(PI)在母胎循环出现问题时会发生改变[3]。子痫前期孕妇的胎儿血流动力学改变可在发病前2～3周通过胎心监护发现，因此理论上来说S/D、PI、RI的改变可用于子痫前期的预测。最新研究发现NLRP3炎症小体介导的炎症及其相关下游产物也与妊娠期高血压疾病的进展存在紧密的关系[4]，然而其对子痫前期的预测价值尚未完全明确。目前关于脐动脉血流参数联合血清NLRP3炎症小体检测用于预测子痫前期的研究甚少，本文拟分析脐动脉血流参数联合血清NLRP3炎症小体检测预测子痫前期的临床价值，为临床上该病的诊断提供参考依据。

1资料与方法

1.1研究对象

选择2017年1月至2020年1月徐州医科大学附属医院收治的子痫前期孕妇82例作为研究组，患者年龄22～38岁，平均(29.13±5.06)岁；孕周23～37周，平均(33.09±2.17)周；病情严重程度[5]：轻度33例，重度49例。同期选取在我院规律产检并且分娩结局正常的单胎妊娠孕妇50例作为对照组，年龄23～40岁，平均(29.08±5.24)岁；孕周23～38周，平均(34.08±2.15)周。两组孕妇年龄、孕周等一般资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)，存在可比性，见表1。本研究经医院伦理委员会批准，所有研究对象及其家属均知情同意。

表1 两组一般资料比较Table 1 Comparison of general data of the pregnant women

1.2纳入排除标准

纳入标准：①符合《妊娠期高血压疾病诊治指南(2015)》[5]中子痫前期的诊断标准；②子痫前期首发；③自然受孕的单胎妊娠孕妇；④规律产检；⑤一般资料完整。

排除标准：①存在子痫前期既往病史；②免疫、凝血功能障碍；③存在对本研究结果产生影响的其他妊娠期合并症；④急性或慢性炎症；⑤重要脏器功能不全者。

1.3研究指标

1.3.1脐动脉血流参数

所有受试者于孕23～38周采用彩色多普勒超声诊断仪、探头频率2.5～5.0mHz，经腹检查。记录胎盘的位置与脐动脉血流情况，将脐带游离段长轴切面作为测量切面，取样框置于脐带与胎盘附着点附近2～3cm处。采样后进行频谱分析，得到3个或3个以上心动周期频谱图。仪器自动计算S/D、RI和PI，避免在胎儿呼吸样运动时测量。由资深的产前超声诊断医生进行测量。

1.3.2血清NLRP3炎症小体检测

实时定量PCR检测NLRP3 mRNA的表达：从血清样本中提取RNA，检测其纯度和浓度，取2μL用于逆转录，参照物为β-肌动蛋白。使用实时荧光定量PCR试剂盒，25μL反应体系，逆转录产物4μL，扩增条件为：95℃ 5分钟，95℃ 20秒，56℃ 5分20秒，72℃ 20秒，35次循环。β-肌动蛋白浓度主要用于校正扩增结果。上述实验重复进行3次，计算NLRP3 mRNA的相对表达量，再取均值。

1.4诊断标准

子痫前期诊断的金标准：病理检查结果。S/D、RI、PI及NLRP3诊断的临界值：分别绘制S/D、RI、PI及NLRP3预测子痫前期的ROC曲线，根据各切点的敏感度和特异度，计算约登指数，以约登指数最大值所对应的数值作为最佳临界值。S/D、RI、PI及NLRP3联合诊断的方式为平行联合，即：任何一个检测方法出现阳性，即判定为阳性。

1.5预测效果评价

计算ROC曲线下面积(AUC)评价预测效果。AUC<0.5视为无预测价值，在0.5～0.7视为预测准确性较低，在0.7～0.9视为预测准确性较高，>0.9视为预测准确性最高。

1.6统计学方法

2结果

2.1两组脐动脉血流参数和血清NLRP3水平比较

研究组S/D、RI、PI及NLRP3水平均高于对照组(t值分别为44.643、11.601、5.622、15.199，P<0.05)，见表2。

表2 两组脐动脉血流参数和血清NLRP3水平比较Table 2 Comparison of umbilical arterial blood parameters and serum NLRP3 level of the pregnant women between the two

2.2脐动脉血流参数及血清NLRP3炎症小体与子痫前期的相关性分析

相关性分析结果显示，S/D、RI、PI、NLRP3与子痫前期的发生存在正相关关系(r值分别为0.610、0.718、0.427、0.796，P<0.05)，见表3。

表3 脐动脉血流参数及血清NLRP3炎症小体与子痫前期的相关性分析Table 3 Correlations of umbilical arterial blood parameters and serum NLRP3 inflammasome with preeclampsia

2.3脐动脉血流参数联合血清NLRP3预测子痫前期的效果分析

S/D、RI、PI、NLRP3预测子痫前期的敏感度在79.30%～97.60%之间，特异度在60.00%～92.00%之间，S/D、RI、PI、NLRP3联合预测的敏感度、特异度分别为97.60%、92.00%，高于单独检测的预测效果(P<0.05)，见表4。

表4 脐动脉血流参数联合血清NLRP3预测子痫前期的ROC分析Table 4 ROC analysis of umbilical arterial blood parameters combined with serum NLRP3 for predicting preeclampsia

ROC曲线分析显示，S/D、RI、PI、NLRP3单独预测子痫前期的AUC分别为0.886(95%CI：0.828～0.944)、0.933(95%CI：0.893～0.974)、0.756(95%CI：0659～0.854)、0.981(95%CI：0.964～0.998)，联合预测的AUC为0.984(95%CI：0.969～0.999)，联合检测对子痫前期的预测准确性更高(P<0.05)。脐动脉血流参数及血清NLRP3单独或联合检测以预测子痫前期的ROC曲线图见图1。

注：A图为S/D、RI、PI、NLRP3单独预测子痫前期的ROC曲线图；B图为S/D、RI、PI、NLRP3联合预测子痫前期的ROC曲线图。图1 脐动脉血流参数联合血清NLRP3预测子痫前期的ROC曲线图Fig.1 ROC curve of umbilical arterial blood parameters combined with serum NLRP3 for predicting preeclampsia

3讨论

3.1脐动脉血流参数及NLRP3与子痫前期的关系

子痫前期是引发全球孕妇和胎儿死亡与患病的主要原因之一，对3%～5%孕妇产生严重的困扰，最近几年，该病在发达国家的发生率逐步升高[6]。从特发于肾脏到慢性肾炎再到循环系统的毒性状态，关于子痫前期的概念近年来发生了较大的转变，从微循环指标对此病的影响到不再重点突出血清相关蛋白对子痫前期的诊断价值，临床上对子痫前期的认识有了很大的进步[7]。研究发现子痫前期对母胎的健康影响严重，由于胎盘的低灌注引发胎儿宫内生长不良，胎儿死亡率提升；存在子痫前期既往史的孕妇发生心血管不良事件及终末期肾病的几率也大大增加，特别是早发型重度子痫前期[8]。如果对子痫前期的认知程度加深，在该病的诊治和并发症的预防方面才能更好地应对。

NLRP3炎症小体相关信号通路可以被多种内、外源性刺激因子激活，然而具体的作用机制未完全明确[9]。有研究认为钾离子水平的变化可能与NLRP3炎症小体的激活存在一定的关系，细胞膜表面5-磷酸腺苷配体门控离子通道与相关受体结合。细胞外三磷酸腺苷直接激活三磷酸腺苷嘌呤受体P2X7信号通路，诱导缝隙连接半通道开放，钾离子流出和钙离子流入，最终激活NLRP3炎症小体，激活后NLRP3炎症小体释放大量成熟的白细胞介素-1β炎性细胞因子参与淋巴细胞的分化和迁移，并激活其他淋巴细胞。活化的淋巴细胞产生更多的炎症因子，促进血管紧张素Ⅱ的释放。由这些炎症因子组成的炎症环境可促进钠在血管和肾脏中的滞留，引起血管重构和收缩，最终引发高血压[10]。随着胎儿的发育，其脐动脉舒张期血流速度加快，阻力降低。正常脐动脉波形在妊娠晚期表现为低PI和RI，在子痫前期，由于胎盘血管阻力增加，脐动脉血流量减少，多普勒超声测速显示胎盘阻力增加，表现为脐动脉血流速度降低或消失，PI升高[11]。梁美丽等于2020年研究发现，随着脐动脉S/D值和舒张末期血流丢失的增加，子痫前期的发生率高于脐动脉参数正常者，另外，脐动脉血流参数异常可预测胎儿的不良结局。

3.2脐动脉血流参数及NLRP3预测子痫前期的价值

本研究结果显示，研究组孕妇S/D、RI、PI、NLRP3值均高于对照组(P<0.05)，提示相比正常妊娠的孕妇，子痫前期组脐动脉血流参数和血清NLRP3水平均升高。相关性分析显示，S/D、RI、PI、NLRP3与子痫前期存在正相关关系(P<0.05),提示脐动脉血流参数和血清NLRP3水平的变化与子痫前期的发生存在紧密的关系。分析认为子痫前期脐动脉血流参数的变化可能与胎盘缺血导致胎儿血流分布异常有一定的关系[12]。随着妊娠期高血压病情的加重，孕妇NLRP3表达水平随之升高，两者存在正相关关系， S/D、RI、PI和NLRP3炎症小体也可作为妊娠期高血压疾病早期诊断的参考指标[13]。S/D、RI、PI、NLRP3诊断子痫前期的敏感度在79.30%～97.60%之间，特异度在60.00%～92.00%之间，S/D、RI、PI、NLRP3联合预测的敏感度和特异度分别为90.30%、60.00%，与上述指标单独预测比较敏感度和特异度更高，有统计学意义(P<0.05)，提示S/D、RI、PI、NLRP3联合预测相比单独预测的效果更好。ROC曲线分析结果显示，S/D、RI、PI、NLRP3及联合预测子痫前期的AUC分别为0.886、0.933、0.756、0.981、0.984，有统计学意义(P<0.05)，相比单独预测，联合预测的AUC更大，说明联合预测的准确性更高。