表达非洲猪瘟病毒CD2v与P12蛋白的重组伪狂犬病毒的构建
2021-02-10梁旺旺李成龙陈文智丰志华蔡少丽陈骐
梁旺旺 李成龙 陈文智 丰志华 蔡少丽 陈骐
(福建省天然免疫生物学重点实验室 福建师范大学南方生物医学研究中心,福州 350117)
非洲猪瘟(African swine fever,ASF)由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)感染家猪及野猪引起的一种急性、出血性、烈性传染病[1]。该病于1921年在肯尼亚首次报道,迄今已成为全球性猪养殖业难题,其致死率约为100%[2]。2018年8月,我国辽宁省沈阳市出现首例国内非洲猪瘟病例,至今疫情已扩散至全国[3]。
ASFV为双链DNA病毒,病毒颗粒直径约200 nm,具有多层结构,由类核、核壳、内包膜、衣壳和宿主衍生的外包膜组成[4]。根据毒株的不同,基因组大小介于170-190 kb之间,含约150个开放阅读框(ORFs),至少可编码54个结构蛋白和100多个非结构蛋白[5]。ASFV CD2v与宿主的CD2结构与功能类似,主要参与ASFV的免疫逃逸,以及感染细胞后对红细胞的吸附[6]。在弱毒活疫苗研发过程中CD2v通常被删除,研究表明缺失CD2v后的毒株接种家猪后无明显临床感染症状,可以保护强毒攻击[7]。与CD2v不同,P12位于外囊膜及内囊膜上,目前P12被认为是ASFV与宿主细胞结合的配体,用重组P12蛋白孵育细胞后体外感染被阻断,且针对P12的抗体被证明阻碍了病毒与宿主细胞的结合,但并不能完全抑制病毒结合或中和病毒感染,因此它不是导致病毒对细胞结合的唯一配体[8]。CD2v与P12通常被用作DNA疫苗、亚单位疫苗和病毒载体疫苗的研发,研究表明将CD2v与P12蛋白通过哺乳动物细胞和杆状病毒载体表达系统表达后制成亚单位疫苗,或将CD2v与P12制成DNA疫苗或病毒载体疫苗对猪进行接种,可检测到体液免疫反应和细胞免疫反应[9-11]。……
