王欢禹 常昊宛 章崇祺 金卫林 魏芳

（上海交通大学生命科学技术学院，上海 200240）

嵌合抗原受体T细胞治疗（chimeric antigen receptor T cell therapy，CAR T cell therapy）是目前较为有效的肿瘤免疫治疗方法，主要是通过慢病毒等方式改造病人外周血中分离的T细胞，获得表达特异性嵌合抗原受体（chimeric antigen receptor，CAR）的T细胞，从而实现对肿瘤的特异性治疗［1］。嵌合抗原受体是将识别肿瘤相关抗原（tumor-associated antigen，TAA）的单链抗体（single chain antibody fragment，scFv）、跨细胞膜锚定序列以及T细胞的活化序列在体外进行基因重组而成的人工融合基因。它能够将抗体对肿瘤抗原的高亲和性和T淋巴细胞的杀伤机制相结合，使其能特异性地识别和杀伤肿瘤细胞［2］。与T细胞抗原受体（T cell receptor，TCR）不同，CAR可以不依赖于主要组织相容性复合体（major histocompatibility complex，MHC）的识别，高度特异性地靶向抗原［3］。迄今为止，CAR T细胞在血液恶性肿瘤的治疗疗效显著。2017年8月，FDA批准使用靶向CD19的CAR（Kymriah）治疗小儿复发或难治性急性淋巴细胞白血病（ALL）；同年10月，FDA批准了另一种靶向CD19的CAR（Yescarta）用于治疗成人复发或难治性大B细胞淋巴瘤。此外，欧洲药品管理局（EMA）也于2018年6月批准了这两种药物的使用。然而对实体瘤的CAR T细胞治疗的疗效尚待进一步的研究及提高［4］，而决定这一疗法成功与否的关键因素之一就是选择合适的肿瘤标志性抗原为靶点。目前在实体瘤中在实验及临床前对多个靶点开发相应的靶向CAR T治疗［5-6］。随着人们对不同肿瘤类型的更深入了解，更多靶向肿瘤特异抗原的CAR T也在不断涌现。这些靶向肿瘤特异的标志性抗原的新型CAR-T细胞，需要使用敏感的CAR分子检测方法对CAR-T细胞染色及鉴定以确定其有效性。……