姚佳颖 毛彦军 王杉杉 卢 涵 王 博 应琳琳 李 垚

(东北农业大学动物科学技术学院，哈尔滨150030)

饲料蛋白质利用率低已成为世界各国养猪业普遍存在的问题，不仅浪费蛋白质资源，还会因为过多氮排泄造成环境污染，添加饲料添加剂是提高饲料蛋白质利用的有效措施之一。本课题组前期研究证明，沙棘黄酮可提高肉鸡和蛋鸡蛋白质利用率[1]，同时发现提高肉鸡蛋白质利用率与槲皮素激活雷帕霉素靶蛋白(target of rapamycin，TOR)信号通路有关[2]。而槲皮素是沙棘黄酮的主要成分，具有抗菌、消炎、抗病毒、抗氧化、免疫调节等多种活性[3-5]。此外，槲皮素还可以促进畜禽对其他营养物质的利用[2,6-7]，这些结果均表明，饲粮添加黄酮类化合物是提高饲料蛋白质利用率的有效途径。然而关于槲皮素影响饲料蛋白质利用的机制研究尚不完善，特别是槲皮素对猪利用饲料蛋白质的作用机制研究仍属空白。因此，本研究以猪肠上皮细胞作为模型，研究槲皮素对猪肠上皮细胞利用蛋白质的作用机制，旨在为槲皮素在养猪生产中的应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验仪器及材料

ELITE-300PLUS型基础电泳仪电源(美国Wealtec)；5415C型高速冷冻离心机(德国Eppendorf)；UV-2540分光光度计(日本SHIMAZDU)；NanoDrop超微量紫外-可见光分光光度计(美国ThermoFisher)；Yrdimes SW07D0567蛋白印迹仪(美国Wealtec)；Li-COR Odyssey凝胶成像分析系统(美国Li-COR)；ABI Prism 7500型实时荧光定量PCR仪(德国Roche)。

猪肠上皮细胞由中国科学院亚热带生态研究所印遇龙院士惠赠；DMEM/F12培养液购自Invitrogen公司；无支原体胎牛血清购自Gibco公司；槲皮素(纯度≥97%)、二甲基亚砜(DMSO)、双抗、磷酸盐缓冲液(PBS)皆购自美国Sigma公司；……