冉 艳，卢明珊，曾德亮，张笃文，金宏玲

缺血性脑卒中是一种中老年人常见的疾病，是由于流向脑组织的动脉血管阻塞引起的。当血栓溶解治疗成功后，血流供应恢复会造成更加严重的二次损伤，这一过程被称为脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia-reperfusion injury，CIRI）。CIRI的病理机制十分复杂，涉及了包括炎症反应、氧化应激、能量代谢损伤、钙超载、凋亡以及自噬等一系列因素，其中自噬起着较为关键的作用。七氟烷是一种新型吸入式麻醉药，具有起效迅速，组织摄取量少，苏醒较快等优点。研究表明七氟烷还具有颅神经保护的作用，可减轻由CIRI引起的损伤。目前对七氟烷在CIRI中的保护作用的机制研究尚存在许多空缺。该研究通过建立大鼠脑中动脉缺血（middle cerebral artery occlusion，MCAO）模型，并通过七氟烷处理模型，探究七氟烷对CIRI损伤的影响及其可能的作用机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂

七氟烷（批号：20080681）购自山东鲁南贝特制药有限公司；戊巴比妥钠（批号：P010）购自美国 Sigma-Aldrich；2%TTC染色液（批号：G3005）、HE染色液（批号：G1120）、RIPA裂解液（批号：R0010）、TRIzol提取液（批号：15596026）购自北京索莱宝生物公司；TUNEL凋亡试剂盒（批号：C1091）购自上海碧云天生物技术有限公司；肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α，批号：H052）、白细胞介素（interleukin，IL）-6（批号：H007）、IL-10（批号：H009）ELISA试剂盒购自南京建成生物有限公司；SsoFastEva-GreenSupermix试剂盒（批号：1725200）购自美国 Bio-rad公司；3-甲基腺嘌呤（3-methyladenine，3-MA，批号：S2767）购自美国 Selleck公司；沉默信号调控因子1（silent information regulator 1，SIRT1）siRNA购自上海吉玛生物技术公司；引物由上海生工生物公司合成；β-actin、微管相关蛋白1轻链3（microtubule-associated protein 1 light chain 3，LC3，批号：ab51520）、p62（批号：ab109012）、SIRT1（批号：ab12193）抗体购自英国Abcam公司。

1.2 实验动物

100只雄性8周龄SPF级SD大鼠购自上海斯莱克实验动物有限公司，体质量300～320 g，生产许可证号：SCXK（沪）2017-0005，在常温、标准湿度的封闭条件下，12 h／12 h昼夜交替喂养3 d，水和食料正常供给。……