肖中岳，轩青霞，高 强

炎症性肠病（inflammatory bowel disease，IBD）是一类目前临床上尚无法治愈的慢性肠道病变。炎症因子引起的机体过氧化反应是IBD发病时引起肠道损伤的重要因素。肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）诱发细胞核因子 κB（NF-κB）表达，而NF-κB可进一步诱发炎症因子如白细胞介素 1-β（interleukin-1β，IL-1β）和 TNF-α的表达，加强机体炎症反应。丙二醛（malondialdehyde，MDA）作为氧化应激的重要标志物，可以有效地反映组织氧化应激反应的程度。Cyp4a14基因可调节宿主细菌感染引起的结肠组织炎性反应，但其发生机制尚不清楚。该研究使用葡聚糖硫酸钠（dextran sulphate sodium，DSS）建立 Cyp4a14野生型 （Cyp4a14） 和基因敲除纯合型（Cyp4a14）小鼠肠炎模型，探讨 Cyp4a14基因与MDA及相关炎症因子对小鼠肠道黏膜氧化应激反应的影响，为进一步研究Cyp4a14基因对IBD发病的调节作用和新型药物研发提供新的思路。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物 所选健康清洁级129S1／SvJ种系 Cyp4a14和 Cyp4a14小鼠（河南科技大学第一附属医院动物实验中心饲养），保持小鼠生活环境清洁卫生及通风良好，给予足量SPF级混合配方颗粒饲料（购于北京华阜康生物公司）和新鲜饮水，自由饮食。入组标准：雄性，6～8周龄，体质量20～23 g。

1.1.2 主要材料 DSS试剂购于美国MP Biomedicals公司；MDA试剂盒购于上海碧云天生物技术研究所；RNA提取试剂购于美国Invitrogen公司；逆转录和PCR试剂盒购于日本Takara公司；引物合成于上海生工生物工程有限公司。

1.2 方法

1.2.1 入组前基因鉴定 选用 Cyp4a14和Cyp4a14小鼠作为种鼠，子代可出现3种表型：野生型 Cyp4a14、杂合子 Cyp4a14和基因敲除纯合型Cyp4a14。剪取小鼠尾巴尖端约0.5 cm，抽提尾尖DNA，采用PCR扩增，最后用琼脂糖凝胶电泳鉴定基因。……