杨湘黔 崔京春* 曾诗娴 成 丽 张珂彬 胡晓红 鲍雅静

(1.大连民族大学生命科学学院，大连116600;2.大连民族大学环境与资源学院，大连116600)

豆粕是大豆加工的副产物，因富含多种营养物质，是目前使用最广泛的植物性蛋白质饲料原料，但因豆粕中含有抗营养因子影响了动物对饲粮的消化吸收和利用[1-3]。解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)是一种广泛被用于开发微生物饲料添加剂的革兰氏阳性芽孢杆菌[4-5]，它能够产生蛋白酶、纤维素酶、淀粉酶、脂肪酶等多种酶类，并能产生对动物病原菌中的大肠杆菌、梭状芽孢杆菌、沙门氏菌等具有较强的抑制能力的物质[6-8]。研究表明，利用解淀粉芽孢杆菌发酵豆粕不仅可以降低豆粕中的抗营养因子含量，且可提高动物对豆粕饲料的消化吸收率[9-12]。解淀粉芽孢杆菌在发酵豆粕饲料中的数量是影响豆粕发酵效果的关键因素之一，而由于用于发酵的豆粕为未灭菌原料，在进行接种菌的数量检测时会因自身带有的微生物的干扰，造成常用的微生物数量检测平板活菌计数法计数不准或者难以计数，并且由于该方法检测周期通常长达2～3 d，无法实现对豆粕发酵生产过程的即时监控[13-16]。

近几年，基于DNA水平上的微生物数量检测分子生物学方法越来越多，包括常规PCR技术、变性梯度凝胶电泳技术、实时荧光定量PCR技术等[17-22]。其中，实时荧光定量PCR技术具有特异性强、灵敏度高、操作时间短的特点，且由于在检测过程中均为闭管操作不会造成因污染而出现的假阳性结果[23-24]。……