邹韵涵 崔慧情 丘颖琛 李筱迪 龙子昕 曹智铭 马宁芳 刘珊珊

病毒、寄生虫、酒精等均可对肝脏造成损伤并引起肝纤维化，其表现为细胞外基质过量沉积，汇管区纤维异常增生，继而假小叶和再生结节形成，是各种慢性肝病向肝硬化发展所共有的病理改变和必经途径[1-2]。肝星形细胞(hepatic stellate cells，HSC)活化是肝纤维化发生发展的关键环节[3-4]。HSC围绕在肝窦周围，正常状态下，HSC在肝内处于静息状态；在肝损伤因子刺激后，HSC活化为肌成纤维样或成纤维样细胞，活化的HSC增生并向损伤区域迁移，表达各种细胞外信号转导通路蛋白，并产生大量以胶原纤维为主的ECM，进而导致肝纤维化形成[4]。及时采取有效措施干预其活化过程对阻断肝纤维化进展至关重要。

细胞骨架蛋白纽蛋白(Vinculin)是一种黏着连接相关蛋白，存在于细胞-细胞及细胞-细胞外基质间的黏着部位，其作用是将纤维状肌动蛋白锚定于连接点胞膜上，通过与多种细胞骨架蛋白、黏着斑蛋白的相互作用，在细胞黏附、迁移、增殖等过程中发挥关键作用[5-6]。有研究发现在肺纤维化区域的肺泡上皮细胞及间质细胞中Vinculin表达增强[7]，提示Vinculin蛋白可能参与了纤维化过程，但具体机制不清。本研究探讨Vinculin与HSC活化是否有关，深入解读肝纤维化分子机制，为优化临床治疗策略提供新思路。

材料与方法

一、实验材料

Vinculin-siRNA(广州市锐博生物科技公司)，一抗稀释液(上海市碧云天生物技术有限公司)，兔抗Vinculin单克隆抗体(英国abcom公司)，兔抗α抗com多克隆抗体(中国BOSTER公司)，鼠抗Desmin单克隆抗体(中国BOSTER公司)，兔抗GAPDH 单克隆抗体(美国CST公司)，羊抗兔二抗(美国Pierce公司)，羊抗鼠二抗(美国Pierce公司)。……