刁力 李波

海阳市人民医院 265100

高尿酸血症是体内嘌呤代谢紊乱和尿酸排泄异常所致的血尿酸水平升高，已经成为一种常见病，不仅可以导致痛风、痛风性关节炎及痛风性肾病，其对心血管系统也有损伤作用，是心血管疾病的独立危险因素［1］。近年来一些研究显示高尿酸可刺激内皮细胞发生功能异常［2-4］，但具体机制尚不清楚。内皮细胞功能紊乱是动脉粥样硬化发生的病理基础，在动脉粥样硬化的发病过程中扮演着重要作用［5］，对内皮细胞功能受损机制的研究已成为动脉粥样硬化性疾病的研究热点。本研究体外培养HUVEC，观察不同浓度的尿酸对HUVEC的ROS水平、NO含量及eNOS mRNA表达的影响，了解尿酸对内皮损伤的作用途径，以探讨高尿酸血症在动脉粥样硬化发生发展过程中的作用及其机制，对动脉粥样硬化的防治有应用价值。

1 材料与方法

1.1 材料 人脐静脉内皮细胞（中心实验室友情提供）；DMEM、0.25%胰酶/0.02%EDTA、胎牛血清（Hyclone 公司）；尿酸（Sigma 公司）；青霉素-链霉素双抗（Solarbio 公司）；磷酸盐缓冲液（Solarbio 公司）；eNOS 抑制剂L-NAME（Selleckchem 公司）；无水乙醇、异丙醇（国药集团化学试剂有限公司）；PCR 引物（生工生物工程上海股份有限公司）；ROS 荧光探针-DHE（威格拉斯生物技术有限公司）；NO 试剂盒（南京建成生物工程研究所）；总RNA 试剂盒（美国Omega 公司）；逆转录试剂盒、荧光定量PCR 试剂盒（天根生物公司）。

1.2 方法

1.2.1 尿酸溶液的配置 1 ml NaOH 液体（1 mmol/L）中加入13.45 mg尿酸粉末，溶解后加至49 ml DMEM 完全培养基中，混匀过滤除菌至50 ml无菌离心管中，吸取300 μl测定其尿酸浓度，由所测结果调整至目标浓度1 600 μmol/L。……