黄莹莹 徐琴 姜宇

1浙江大学医学院公共技术平台，杭州 310058；2浙江大学医学院附属邵逸夫医院风湿免疫科，杭州 310016；3浙江大学基础医学系，杭州 310058

近年来，流式细胞术作为临床检验中无可替代的重要技术之一［1］，已普遍应用于免疫学、神经生物学、肿瘤学、血液学、造血干细胞移植等研究领域［2-5］，甚至也是农业学科的有效检测方法［6］，使用广泛。流式细胞仪是应用流式细胞术的有效工具，分选型流式细胞仪一般还有筛分的作用，可以根据所检测颗粒的某种性质进行分选和回收，用于后续功能试验。并且，如果整个分选的过程是在无菌条件下进行的，分选下来的细胞还可以用来继续培养。但分选之前仪器的条件设置和调试都比较繁琐、费时［7］，在实际运行中受到多种因素的制约［8］。其中，分选的3 大要素，分选纯度、速度、得率是呈三角制衡关系的［9］。高效地获得高得率、高纯度的靶生物颗粒，是完成一个完美分选及下游试验的需要。然而分选速率、分选模式及不同尺寸的喷嘴均是影响分选得率的较大因素。如何优化流式细胞分选仪的关键要素，探索高效的分选条件，提高分选得率和纯度的研究，国内外并不多见。

BD FACS Sorp Aria II 是BD 公司推出的定制型高端流式细胞分选仪，与传统Aria II 相比，该仪器在激光器功率、光路设计方面都做了优化。本研究以该Sorp 机型为例，通过比较不同分选速率、分选模式及喷嘴条件下分选得率及纯度的高低，探索优化试验条件，并将优化后的条件应用于原代naïve T 细胞（初始T 细胞）的高效分选，以期达到最佳分选效果，从而为相关研究提供技术支撑与参考。……