IL-17抗体对DSS诱导小鼠溃疡性结肠炎的影响
2021-01-27朱超慧朱建华王艳梅
朱超慧,吴 凯,姚 怡,朱建华,王艳梅,李 楠
随着我国经济水平的增长,溃疡性结肠炎(ulcerative colitis, UC)的发病率呈逐年增高的趋势[1-2]。辅助性T细胞17(Th17细胞)及其分泌的细胞因子在该病的发病过程中起到重要调节作用[3]。因而,我们推测Th17细胞分泌的细胞因子白介素-17(IL-17)有可能成为治疗的潜在靶点。迄今为止,IL-17共发现6个亚型,即IL-17A~IL-17F[4]。IL-17A、IL-17F为最主要的两个亚型,均为Th17细胞活化后分泌的细胞因子[5]。在本实验中采用的UC小鼠模型,为口服葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium, DSS)溶液制备的,是UC的经典模型。本实验中给予模型小鼠腹腔内注射IL-17A与IL-17F抗体,观察中和IL-17A与IL-17F是否可减轻小鼠肠道炎症,期望使UC的生物治疗获得新的靶点。现报告如下。
1 材料与方法
1.1材料 选用健康清洁级、雌性C57BL/6J小鼠共48只,IL-17A抗体与IL-17A ELISA检测试剂盒购自Biolegend生物有限公司,IL-17F抗体与IL-17F ELISA检测试剂盒购自Ebioscience生物有限公司,DSS试剂购自MP生物有限公司,便潜血试剂盒购自华晟源科技有限公司。
1.2分组及干预方法 小鼠随机分为正常对照组、模型组、抗IL-17A组、抗IL-17F组,每组12只。正常对照组小鼠饲以清水;模型组、抗IL-17A组、抗IL-17F组小鼠饲以DSS溶液(浓度4%)。所有小鼠自由饮水,每日更换饮水。将IL-17A、IL-17F抗体在4℃,以1300 r/min,离心5 min。离心液中加入灭菌注射用水,配制成浓度为200 μg/ml。实验共7 d,抗IL-17A组、抗IL-17F组小鼠在实验2、4、6 d注射配制的IL-17A、IL-17F抗体至腹腔内,剂量为每只小鼠100 μg。
1.3计算炎症评分并取材 观察小鼠饮食、精神、活动,测体重,观察粪便形态,检测便潜血,计算疾病活动度指数(disease activity index, DAI)评分。1周后,实验结束时处死小鼠,于小鼠眼球取血,收集后,使用ELISA试剂盒检测。……
