梁秀军，代俊利，李 强，郭亚春，高亚贤，宋鸿儒

(1.承德医学院，河北 承 德 067000 2.河北省承德市中心医院，河北 承 德 067000 3.河北北方学院，河北 张家口 075000)

类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis, RA)是一种具有持续性并反复发作的自身免疫性疾病，病变以滑膜炎为主，后期可造成关节软骨和骨的破坏。RA的具体发病机制目前尚未阐明，近年来研究发现Treg细胞在RA中发挥着重要作用[1]。调节性T细胞(regulatory T cells，Treg)是近年来新发现的一组T细胞亚群，其功能主要为负向免疫调节，可以抑制免疫细胞对抗原的呈递功能、减少细胞炎性因子的产生和抗体的分泌，对自身免疫病有抑制作用，对于维持免疫内环境的平衡起到重要作用[2]。Treg细胞特异性表达叉头样转录因子p3(foxhead box protein 3, Foxp3)，Treg细胞发挥抗炎、抑制效应细胞的过度反应和维持免疫耐受的负向免疫调节作用，主要是通过细胞相互直接接触性抑制和抑制性细胞因子的分泌(如IL-10、TGF-β)[3]。本课题组前期的研究发现穿龙薯蓣皂苷元可以抑制胶原性关节炎(collagen induced arthritis, CIA)鼠关节炎症及滑膜血管新生，对RA发挥治疗作用[4]。本研究通过观察磁珠分选后的CIA小鼠脾脏中Treg细胞比例、Foxp3和IL-10的水平变化，初步探讨穿龙薯蓣皂苷元对Treg细胞的影响及可能机制，为寻找穿龙薯蓣皂苷治疗类风湿关节炎的新靶点及穿龙薯蓣的研发提供实验依据。

1 材料与方法

1.1实验动物：30只雄性DBA1/J小鼠，SPF级，7～8周龄，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，许可证号码：SCXK(沪) 2012-0002。

1.2主要试剂与仪器：Chicken type Ⅱcollagen(Chondrex公司，美国)；Freund’s completed adjuvant(SIGMA公司，美国)；CD4+CD25+Treg cell 分选试剂盒(Miltenyi Biotec公司，德国)；CD3/CD28 MACSiBead(Miltenyi Biotec公司，德国)；rIL-2(Peprotech公司，美国)；……