周丽萍，雷 蕾，楚国庆，杨锦亮，李建红，金建宁

卵巢癌是当今社会最常见的病死率很高的恶性肿瘤[1]，因卵巢解剖位置深，故初期起病较隐匿，早期症状不明显，大多数患者就诊时已到晚期，临床治疗效果及预后都不甚理想[2-3]。目前，卵巢癌治疗方面以手术及术后给予顺铂、紫杉醇为基础的联合化疗为主，但患者的5年生存率仍较低[4]，然而紫杉醇联合铂类药物作为治疗卵巢癌的一线化疗药物，极易产生耐药性，最终导致复发率大于50%[5]，且患者生存质量差。基于此，找到有效的抑制卵巢癌耐药、提高患者生存质量的方法具有重要意义。临床观察发现，桂枝茯苓丸联合化疗药物比单一运用化疗药物更能提高临床疗效以及患者生活质量，但其机制目前尚不明确，故本实验研究目的旨在为桂枝茯苓丸的临床运用提供实验基础。

1 资料与方法

1.1 一般资料：实验室所用细胞为人卵巢癌SKOV-3细胞，购自武汉普诺赛生命科技有限公司，货号：C-0215；桂枝茯苓丸主要组成有桂枝、茯苓、丹皮、芍药、桃仁，所有生药购自宁夏明德医药有限公司，采用常规醇提法煎煮，制备成质量浓度9 g/mL,冷却后储存至4 ℃冰箱备用。注射用顺铂(冻干型)购自江苏豪森药业集团有限公司(批号：601191201)，规格30 mg，生理盐水配置成1 mg/ml冷藏备用。

1.1.1 试剂:McCoy,s 5A培养基(武汉普诺赛生命科技有限公司，批号：WHO1111806XP)；CLARK胎牛血清(上海慧颖生物科技有限公司，批号：FB25015)；0.25%胰蛋白酶溶解液(北京索莱宝科技有限公司，批号：T1320)；Cleaved-Caspase 3Antibody(Affinity，批号：AF7022)；Cytochrome c Antibody(Affinity，批号：AF0146)；BCL-2 Antibody，(Affinity，批号：AF6139)；β-actin抗体(北京中杉，TA-09)。……