张 瑜，吕周艳，李艳冰，王蕾蕾

(吉林大学第一医院 干部病房，吉林 长春130021)

阿尔茨海默病(AD) 是一种严重的神经退行性疾病，并伴有进行性认知功能下降，其发病机制复杂，已经成为了一个全球性的公共健康问题[1]。目前淀粉样蛋白假说是被广泛接受的AD发病机制之一[2]，β-淀粉样肽(Aβ)在人脑细胞中的持续积累是AD的核心病理改变。许多抑制Aβ的产生和促进Aβ分解的药物被相继开发出来，然而随着这些靶向药物在三期临床试验中的失败[3]，寻找AD新的分子机制变得非常必要，这将有利于对AD的诊断以及新的靶点药物的研发。

1 资料与方法

1.1 AD小鼠核心发病基因分析

搜集GEO数据库获取6例APP/PS1小鼠以及6例正常小鼠海马组织进行RNA测序(GSE113141)。将全部差异表达基因应用DAVID软件进行基因名称转换。然后行蛋白互作网络分析，cytoHubba在线分析，按照评分筛选出分值最高的基因行miRNA预测，将预测的miRNA和GSE138382进行Venn分析，最终筛选出共同表达的miRNA，从而锁定AD的核心发病基因。

1.2 核心基因表达量的验证

天恩泽试剂盒提取3例APP/PS1转基因小鼠和3例正常小鼠海马组织的RNA，应用BaiTeke试剂盒进行RNA的逆转录以及实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)，验证核心基因在转基因小鼠以及正常小鼠海马组织中的表达量。其中逆转录过程RNA总量设定为1 000 ng。

1.3 核心基因蛋白电泳

对3例APP/PS1小鼠以及3例正常小鼠海马组织应用碧云天试剂盒提取蛋白质，BCA浓度测定后，按照4∶1的比例加入上样缓冲液，在100℃下煮沸4 min。随后蛋白电泳，应用索莱宝试剂盒配置浓缩胶和分离胶，80伏以及120 V的电压下进行20 min和60 min电泳。……