牛坏死杆菌43K OMP 单克隆抗体的制备及鉴定
2021-01-19贺显晶张思瑶蒋剑成王丽娜肖佳薇汪锋锋孙东波郭东华
中国生物制品学杂志 2021年1期
贺显晶,张思瑶,蒋剑成,王丽娜,肖佳薇,汪锋锋,孙东波,郭东华
黑龙江八一农垦大学动物科技学院,黑龙江大庆163319
坏死杆菌(Fusobacterium necrophorum)是革兰阴性、无鞭毛和芽胞的严格厌氧性细菌,广泛存在于人和动物的呼吸道、消化道和泌尿道黏膜,作为一种机会主义病原,能引起人和动物多种坏死性化脓性疾病。坏死杆菌可引起牛肝脓肿、腐蹄病和坏死性喉炎,目前已成为临床子宫内膜炎和乳房炎的特征菌属,给畜牧业带来了严重的经济损失。
牛坏死杆菌侵入动物机体后,主要通过毒力因子完成其对动物的感染以及介导机体损伤,其中主要的致病因子包括:白细胞毒素、溶血素、内毒素脂多糖、血凝素、黏附素、血小板凝集因子、皮肤坏死毒素和一些胞外酶[1]。近10 年来,有关坏死杆菌致病机理的研究多集中在白细胞毒素、溶血素、内毒素等毒力因子[2-7]。外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)作为一种革兰阴性杆菌细胞壁特有的蛋白质,在维持细菌细胞膜完整性、诱导细菌产生耐药性、调节细菌生物被膜形成、促进细菌黏附和侵袭能力、物质运输及介导机体免疫反应等方面,发挥重要作用[8]。因此,深入了解OMP 功能为探究革兰阴性致病菌致病机制奠定了基础。2013 年,本实验室首次鉴定了牛坏死杆菌43K OMP,并在后续试验中发现其能激发出特异性的体液免疫和细胞免疫,其将有望成为坏死杆菌病亚单位疫苗的候选抗原。本文经原核表达系统表达并纯化牛坏死杆菌43K OMP,制备单克隆抗体,为深入研究牛坏死杆菌致病机制及其有效防治措施奠定基础。……
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