李银华，彭玉次，许钟元，余梦婷，王振，马卫兴*，董自波

(1.江苏海洋大学环境与化学工程学院，江苏 连云港 222005；2.江苏海洋大学药学院，江苏 连云港 222005；3.江苏海洋大学海洋科学与水产学院，江苏 连云港 222005；4.江苏省海洋药物筛选重点实验室，江苏 连云港 222005； 5.江苏省海洋药用资源开发工程研究中心，江苏 连云港 222005)

苯扎氯铵是一种精细化工产品，属于季铵盐类阳离子表面活性剂[1]，具有广谱杀菌的作用，在日常生活中得到广泛应用。因此，建立简便且灵敏度高的苯扎氯铵测定方法具有现实意义。

目前，关于苯扎氯铵的测定方法主要有碘酸钾滴定法[2]、化学电离质谱法[3]、紫外-分光光度法[2]、示差分光光度法[4]、高效液相色谱法[5,6]、电位传感器法[7]和气相色谱法[8]等，这些测定方法存在前期处理过程繁琐费时、以及实验成本高等问题，为避免以上问题，本文建立了共振光散射光谱法测定苯扎氯铵。共振光散射光谱属于同步光谱，具有灵敏度高、简便高效等优点。此法常用于材料分析[9,10]、生化分析[11-13]、食品分析[14]等方面，目前未出现SDBS共振光散射光谱测定苯扎氯铵的文献报道。

1 实验部分

1.1 原料与仪器

苯扎氯铵，分析纯，德国Fluka公司；十二烷基苯磺酸钠(SDBS)，分析纯，天津市大茂化学试剂厂；其他试剂均为国产分析纯。

F-7000型荧光分光光度计(激发和发射狭缝宽度为2.5 nm)，日本日立公司；FA2204N分析天平，上海高致精密仪器有限公司；pHS-2型酸度计，上海雷磁仪器厂。

1.2 溶液配制

苯扎氯铵标准溶液：ρ(苯扎氯铵)=10.0 mg/L，准确称取苯扎氯铵2.5 mg于小烧杯中，加少量水充分溶解后转移至250 mL容量瓶中，加水定容，摇匀待用。

标准样品配制方法：在10 mL的比色管中，准确移取适量ρ(苯扎氯铵)=10.0 mg/L的标准溶液，然后再依次加入c(SDBS)=5.0×10-4mol/L的SDBS溶液0.50 mL和pH=8.40的Clark-Lubs缓冲溶液1.20 mL，加水定容，摇匀使其充分溶解；

空白溶液配制方法：在10 mL的比色管中，依次加入c(SDBS)=5.0×10-4mol/L的SDBS溶液0.50 mL和pH=8.40的Clark-Lubs缓冲溶液1.20 mL，加水定容，摇匀使其充分溶解。

1.3 实验方法

将标准样品和空白溶液均放置5 min后置于荧光分光光度计中，设定激发波长(λex)和发射波长(λem)均为285 nm，同步扫描得共振光散射光谱谱图，记录标准样品的共振光散射强度IRLS和空白溶液的共振光散射强度I0，并计算出共振光散射强度差ΔIRLS(ΔIRLS=IRLS-I0)。

1.4 标准曲线的测定

准确移取体积为0.05、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.20和1.4 mLρ(苯扎氯铵)=10.0 mg/L的苯扎氯铵标准溶液，分别置于8只10 mL比色管中，根据1.3分别配制成标准样品溶液，同时配制空白溶液，分别测定在285 nm处标准样品溶液的共振光散射强度IRLS和空白溶液的的共振光散射强度I0，计算ΔIRLS，并绘制标准曲线。

2 结果与讨论

2.1 光谱分析

在200～600 nm 波长范围内(λex=λem)，分别扫描空白溶液及不同浓度的标准样品溶液，所得共振光散射光谱如图1所示，空白溶液的共振光散射强度最弱，加入苯扎氯铵后反应体系的共振光散射强度显著增强，且体系的共振光散射强度随苯扎氯铵浓度的增大逐渐增强。最大吸收峰位于285 nm处，故选择285 nm为测定波长。

图1 共振光散射光谱

2.2 实验条件的优化

2.2.1 Clark-Lubs缓冲溶液的影响

针对Clark-Lubs、HAc-NaAc、Britton-Robinson等缓冲介质对反应体系共振光散射强度的影响进行考察，结果表明Clark-Lubs缓冲介质最佳。探究pH值在7.00～10.00的Clark-Lubs缓冲介质对体系的影响，结果如图2，反应体系共振光散射强度在pH=8.40时达到最大，且用量为1.20 mL时最佳。

图2 pH值的影响

2.2.2 SDBS用量的影响

SDBS属于阴离子表面活性剂，是苯扎氯铵的离子缔合剂，其用量对体系共振光散射强度影响较大。对体积在0.20 ～1.20 mL范围c(SDBS)=5.0×10-4mol/L的SDBS进行考察，结果见图3。SDBS用量为0.50 mL时体系的共振光散射强度达到最大。故选择0.50 mL为SDBS最佳用量。

图3 SDBS用量的影响

2.2.3 反应时间的影响

离子缔合反应的时间能影响体系共振光散射强度，对时间进行考察，结果见图4。

图4 时间的影响

反应体系的共振光散射强度差值在15 min内达到最大且基本稳定，随后急剧下降。因此需在15 min内完成检测。

2.2.4 共存物质的影响

金属离子、糖类以及氨基酸等共存物质会影响反应体系共振光散射强度，对此进行实验考察。结果见表1，根据1.3进行检测，测得相对误差均不超过±5%的条件下，表1中的物质对体系的测定没有干扰，说明建立的方法具有良好的选择性。

表1 干扰试验结果

2.3 标准曲线和检出限

测得标准曲线的实验结果如图5，ΔIRLS与浓度在0.05～1.40 mg/L范围内的苯扎氯铵呈现出良好的线性关系，线性回归方程为ΔIRLS=6 918.05c-441.28，c的单位是mg/L，相关系数R为0.999 2，检出限为0.045 mg/L。

图5 工作曲线

2.4 回收实验

根据处方配比，精密称取苯扎氯铵，分别加入相应的辅料配制成苯扎氯铵模拟贴。将该模拟贴(约含苯扎氯铵20.0 mg)放入烧杯中，加适量水充分溶解，再转移至100 mL容量瓶中，加水定容，充分摇匀，将其过滤，弃去初始50 mL滤液，准确移取后续滤液10.00 mL置于50 mL容量瓶中，加水定容，充分摇匀待用，将此溶液作为待测溶液。平行操作8次得出结果，测得回收率在 97.60%～103.0%之间，平均回收率为101.3%，相对标准偏差(RSD)为1.62%， RSD不超过±5%，满足分析工作需要。

2.5 样品分析

取10片市售的邦迪创可贴(标示量为每贴0.50 mg)，分别剪成碎片，置于小烧杯中，加适量水充分溶解，将溶液转移至100 mL容量瓶中，加水定容，充分摇匀，过滤待用。精密移取一定体积的滤液稀释至所需要的溶液浓度，测定其共振光散射强度，平行测定6次，计算出创可贴中苯扎氯铵的含量和RSD，并且与高效液相色谱法(HPLC)[15]作比较，结果基本一致，结果见表2。

表2 样品中苯扎氯铵含量的分析结果

3 结 论

在pH=8.40的Clark-Lubs缓冲溶液中，基于苯扎铵根阳离子与十二烷基苯磺酸根静电结合形成离子缔合物，引起反应体系的共振光散射强度增强这一机理，建立了一种用于检测苯扎氯铵的共振光散射光谱新方法，其检测波长为285 nm。研究结果表明，回收率为101.3%，RSD为1.62%，符合精细化工产品含量分析的要求，成功地应用于邦迪中苯扎氯铵的检测。相比传统的方法，此方法具有高效便捷、选择性好且成本低等优势。