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薄层色谱法检测大豆皂苷的条件优化

2021-01-18范姝姝徐海军杜维俊赵晋忠岳爱琴

山西农业科学 2021年1期
关键词:大豆优化分析

范姝姝 ,徐海军 ,杜维俊 ,赵晋忠 ,岳爱琴

(1.山西农业大学农学院,山西太谷030801;2.山西农业大学基础部,山西太谷030801)

大豆皂苷是大豆中重要的次生代谢产物之一,具有多种对人体有益的生物活性,如抗癌[1-2]、抗病毒[3]、抗血脂[4],对人结肠癌细胞的抗增殖作用[5-6],以及通过分泌甲状腺激素减少肝脏脂质过氧化[7]。其主要分布在大豆种子中,含量为0.6%~6.2%[8]。大豆皂苷属于五环三萜类齐墩果酸型,由非极性的三萜苷元大豆皂醇A、皂醇B 和β-D- 葡萄糖、β-D-半乳糖、β-D- 木糖、β-D- 葡萄糖醛酸、α-L- 鼠李糖、α-L- 阿拉伯糖6 种糖基及其乙酰化糖基等组成[9-10]。根据苷元不同可将大豆皂苷分为A 类、B 类、DDMP 类、E 类[11-12]。A 类皂苷是大豆皂醇 A 的 C-3和C-22 位上结合了2 个糖基链。目前,A 类皂苷根据 C-22 糖苷的不同分为 3 个系列:Aa 系列(Aa、Au、Ae、Ax、Ay、Ag)、Ab 系列(Ab、Ac、Af、Ad、Az、Ah)和 A0 系列(A0-αg、A0-βg、A0-γg、A0-αa、A0-βa、A0- γa)[13-15]。

目前,对大豆皂苷定性分析的方法有薄层色谱法(Thin layer chromatography,TLC)[16]、高效液相色谱法[17-18]等。HU 等[19]利用高效液相色谱法检测已知大豆皂苷组分,但此方法需要昂贵的仪器。TLC 法是一种定性分析少量物质的一种主要的实验技术,该方法是根据不同的分析物质与固定相、流动相的亲和性不同,从而具有不同的迁移率进行分离[20]。TLC 可以同时分析多个样品,且不需要复杂的仪器,分析成本低,方法简单,结果可直接观察[21]。但采用的薄层色谱法检测大豆皂苷存在边缘效应,比如谱带丢失或拖尾现象,尤其是谱图中低聚糖区与皂苷区相互干扰。因此,对现有TLC 法进行优化,以确保其检测的准确性。

本研究主要通过对TLC 法展开剂配比、展开时间、点样量、展开温度、预饱和时间以及显色条件进行优化,建立一种TLC 法快速检测大豆皂苷的方法,并对20 个大豆材料皂苷类型进行分析,旨在为今后大豆皂苷特异种质的筛选和改良提供技术基础。……

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