加味阳和汤对膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响研究
2021-01-15高伟华李玉杰杨鸿冉李志超杨振国齐鲁董建文王文波
高伟华 李玉杰 杨鸿冉 李志超 杨振国 齐鲁 董建文△ 王文波△
加味阳和汤是名家名方,是董建文教授从医40余载的经验总结,治疗骨性关节炎取得了满意的临床疗效[1],而且通过动物实验发现,加味阳和汤可抑制膝骨关节炎兔关节软骨的退变[2],减轻软骨细胞的退变,延缓胶原蛋白的紊乱[3],但是对于其起效的分子机制尚不明确。骨形态发生蛋白-2(Bone Morphogenetic Protein-2,BMP2)是诱导骨组织形成的关键因子,对骨与软骨的修复有明显的促进作用;Sry相关组蛋白9(Sox9)在软骨内成骨的过程中起了关键的作用,是调控软骨细胞增殖和分化的核心,Sox9可促进软骨细胞的生成及发育成熟,还可促进软骨ECM的主要组成成分Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)的表达[4]。这与加味阳和汤对于骨性关节炎治疗的现代作用机制相似,因此通过实验设计,观察加味阳和汤对于骨性关节炎中BMP2及Sox9表达的影响,以探讨其治疗骨性关节炎分子机制。
1 材料与仪器
1.1 实验动物
60只6月龄雄性普通级健康新西兰大白兔,体质量(2.70±0.32)kg,由济南跑马岭动物繁殖中心提供,合格证号为SCXK(鲁)2010005。饲养条件:室温控制在15~25 ℃,相对湿度维持在45%~60%,动物饲料均由济南跑马岭动物繁殖中心提供,动物自由摄食和饮水,饲养及实验地点为山东中医药大学附属医院实验动物中心。
1.2 实验药物
加味阳和汤,药物组成包括熟地黄21 g,肉桂9 g,鹿角胶12 g,海风藤15 g,鸡血藤15 g,麻黄3 g,川牛膝12 g,白芥子15 g等,由山东中医药大学第二附属医院中药制剂室统一煎制。
按照Meeh-Rubner公式:新西兰兔所需药物剂量=人所需药物剂量×兔体表面积A,A=K×W2/3×10-4,W为兔体质量,K为常数(家兔为10,人为10.6),计算出大鼠给药剂量作为大鼠与成人的等效剂量。……
