长链非编码RNA SNHG15通过miR-141-3p /KLF9机制调控鼻咽癌细胞增殖的实验研究
2021-01-15易亭伍宿向东
易亭伍,梁 睿,宿向东
(1.四川省乐山市人民医院肿瘤血液科,四川 乐山 614000;2.四川大学华西临床医学院,四川 成都 610041)
鼻咽癌是我国最常见的头颈部恶性肿瘤之一[1]。同步放化疗明显改善了鼻咽癌患者的局部控制率及生存[2]。但晚期或局部晚期鼻咽癌在经过标准治疗后仍常出现复发及远处转移。所以,研究鼻咽癌增殖转移的分子机制,为治疗鼻咽癌寻找新的药物靶点尤为重要。长链非编码RNA(Long non-coding RNA,lncRNA)在恶性肿瘤的发生与发展中起到重要的调控作用[3]。lncRNA主要通过调控相关的microRNA(miRNA)来影响下游基因的表达,从而影响肿瘤细胞的增殖及分化。长链非编码核仁小RNA宿主基因15(Small nucleolar RNA host gene 15,SNHG15)在肝细胞肝癌[4]、结肠癌[5]等多种恶性肿瘤中扮演着促癌的作用,但其在鼻咽癌中的表达及生物学功能尚无相关报道。本研究探究SNHG15在鼻咽癌中的表达,并分析其下游miRNA调控通路,希望为研究鼻咽癌分子生物学行为及潜在治疗靶点提供参考。
1 材料与方法
1.1 研究材料 本研究共收录50例鼻咽癌标本及28例正常组织。所有组织均由四川大学华西医院的病理科诊断。正常鼻咽上皮组织取自非邻近肿瘤组织。所有受试者已签署知情同意书。人鼻咽上皮细胞系NP69和4种鼻咽癌细胞系,CNE1、CNE2、SUNE1、HONE1均购自美国模式培养物集存库(ATCC)。所有细胞均培养在含10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素/链霉素的RPMI-1640培养基中,细胞置于5% CO2、37 ℃细胞培养箱中培养。
1.2 研究方法
1.2.1 细胞转染:将CNE1和SUNE1细胞培养在6孔板中达到60%~70%的密度。将si-SNHG15(上海Genepharma公司,C-01-1804121)、阴性对照序列(NC)分别由转染试剂Lipofectamine 2000转染入细胞。……
