范茁，吴振强

华南理工大学生物科学与工程学院，广州510006

心血管疾病是威胁中老年人身体健康的主要疾病，发病率随年龄增长而提高。心肌肥大是高血压、心肌缺血等心血管疾病发展过程中的病理状态，持续的心血管压力、容积过载会诱发心肌细胞多种信号分子的改变，引起心肌纤维化，舒缩功能损伤，最终导致心衰死亡。心肌肥大的一个重要临床表现是心率失常，触发了一系列细胞因子及生化分子的改变［1-4］，严重心率失常会诱发猝死，心率失常在单细胞电生理水平上则表现为动作电位时程和跨膜离子电流的改变。瞬时外向钾离子电流（Ito）存在于多种哺乳动物心肌组织，其构成成分有Kv4.2、Kv4.3、Kv1.4等，KChIP作为辅助亚基可以调节Kv通道的表达、激活和失活等动力学特性。大鼠等啮齿类动物心肌细胞Ito主要由Kv4.2和Kv4.3组成，受KChIP2亚基调节。Ito可影响心肌细胞动作电位的早期复极化的形态，决定动作电位的时程［5-11］。2020年3—11月，我们观察了大鼠肥大心肌细胞动作电位、Ito变化，并探讨其分子机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂及溶液 配制溶液盐类、ISO购自美国Sigma公司；Ⅱ型胶原酶和蛋白酶购自美国Wrothington公司；肝素钠和戊巴比妥钠购自阿拉丁试剂公司；RT-PCR试剂盒购自日本Takara公司。

1.2 大鼠肥大心肌细胞模型制备 ①心肌细胞分离：采用酶解法急性分离大鼠心室肌细胞，具体方法如下：取1只成年雄性SD大鼠，腹腔注射肝素钠（1 000 U/kg），戊巴比妥钠（0.2 mg/100 g）注射麻醉，腹部向上平放于托盘上，用剪刀减去胸部被毛，之后用75%的……