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绿茶多酚在新药设计中的应用研究

2021-01-07徐斯盛郭抗萧臧婧蕾周羽

生物化工 2020年6期
关键词:肝癌剂量

徐斯盛,郭抗萧,臧婧蕾,周羽

(长沙卫生职业学院,湖南长沙 410001)

有关数据表明,经常喝茶可以有效预防VEGF导致的角膜血管的产生[1],茶叶中的绿茶多酚进入体内有效阻止了皮细胞的进一步增生,致使小血管的数目与长度显著降低。但绿茶多酚在设计相应的抑制药物等领域仍没有迈出具有突破性的一步。所以,把绿茶多酚运用于抑制性新药物的设计中实际意义重大。表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是绿茶多酚中儿茶素类化合物的主要成分,本研究利用其抑制特性以及潜在的抗癌性对绿茶多酚作进一步研究,以期找到有效抑制癌细胞增殖的化合药物。

1 材料与方法

1.1 试验材料

肝癌细胞株HepG2,湖南丰晖生物科技有限公司产品。HepG2细胞株适应于青霉素与链霉素皆为100 U/mL的RPMI1640培养基中,培养箱环境为:温度37 ℃、湿度充足、CO2含量5%。茶鲜叶,长沙普韵茶叶有限公司产品。

1.2 试剂与仪器

磷酸盐缓冲液(PBS),长沙中天生物技术开发有限公司;RPMI1640培养基,杭州吉诺公司;胰酶、儿茶酚氧位甲基转移酶、硫酸基转移酶(SULT)、PAPS硫酸基供体、葡萄糖醛酸转移酶,湖南天合生物公司产品;噻唑蓝(MTT),Sigma;DAPI试剂,长沙维世尔公司;AnnexinV—F1TC试剂盒,上海市卧宏公司;二甲基亚砜(DMSO),上海艾锐化工有限公司。

3H24RI台式智能高速离心机,长沙东旺实验仪器有限公司;DM6 B荧光显微镜,德国徕卡;LSRII流式细胞检测仪,长沙科文生物科技有限公司。

1.3 试验方法

1.3.1 材料预处理

茶鲜叶充分晒干,抑制多酚氧化酶活性,保留30%的绿茶多酚,在20 ℃环境下称取磨碎茶样2 g,用300 mL超纯水煮沸,50 min后静置冷却再过滤,滤液用PBS制备成10 g/L浓度的溶液,再次过滤杀菌后避光低温贮存,用前稀释至指定浓度。……

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