袁留生，周伟

（1.复旦大学 生命科学学院，上海 200438；2.复旦大学 化学系，上海 200032）

人参皂苷Compound K（CK）是天然的二醇型人参皂苷Rb1、Rb2、Rc等在人肠道内的代谢产物[1]，目前主要通过微生物转化或糖苷酶水解制备[2]。作为一个多靶点、高活性化合物，CK具有非常广阔的应用前景和开发价值[3]。本课题组Zhou和Yan等人在前期研究中已经建立了较完整的微生物转化制备工艺[4-5]，但目前的工艺还存在较多不足之处，如摩尔转化率还不够高，转化底物的普适性还有待拓展，硅胶柱纯化工艺成本高、收率偏低，最终产品的纯度较低，还达不到原料药纯度（98%）等，所以工艺有待进一步优化。本研究在前期研究的基础上，通过对发酵条件的进一步优化，并建立新的纯化工艺，以进一步提高CK成品的收率和纯度。

1 材料与方法

1.1 材料

三七茎叶总皂苷，红云生物技术有限公司；三七二醇总皂苷，云南香格喜玛生物技术有限公司；人参皂苷CK标准品，实验室自制（纯度＞99%）。

主要培养基由葡萄糖、蔗糖、酵母粉、花生粉、大豆蛋白、玉米麸皮、黄豆粉，琼脂粉、麸皮粉构成，由浙江海正药业股份有限公司提供。

(NH4)2SO4、MgSO4、CaCl2、乙醇、甲醇、丙酮和磷酸等，分析纯，购自国药集团（上海化学试剂有限公司）；甲醇、乙腈，HPLC级，购自Thermo Fisher（美国）；95%工业乙醇，购自沧盛化工有限公司（河北）。大孔树脂D101、H41、S80、H60、AB-5，购自天津浩聚树脂科技有限公司；GF254薄层色谱硅胶预制板，购自上海泰坦科技股份有限公司。

1.2 设备

1100系列高效液相色谱仪，配有四元梯度泵、自动进样器和可变波长扫描紫外检测器，Agilent USA；……