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滇牡丹种子实时荧光定量PCR分析中内参基因的筛选与验证

2020-12-21潘沫晗陆添权田波

生物技术通报 2020年9期
关键词:分析

潘沫晗 陆添权 田波

(1. 中国科学院西双版纳热带植物园 热带植物资源可持续利用重点实验室,昆明 650223;2. 中国科学院大学,北京101408)

滇牡丹(Paeonia delavayi)属芍药科芍药属(Paeonia)牡丹组(Sect.MoutanDC.)植物,是中国西南地区特有的野生资源植物,是芍药属分布最南的一个牡丹类群[1]。作为一种民族药材,其根皮入药称为丹皮,用于镇痛、镇静、抗炎、退热、止血、降糖,具有很好的药用价值[2]。同时滇牡丹是油用牡丹新品种培育的重要种质资源,也是开发食用油的潜在木本油料植物资源之一。牡丹籽油作为一种多功能食用油,含有至少14种脂肪酸成分,包括油酸、亚油酸、亚麻酸、棕榈酸、硬脂酸等,其中亚麻酸的含量极高[3],油脂品质优良,营养丰富。目前,关于滇牡丹的研究主要集中在栽培学[4]、孢粉学[5]、病害防治[6]及遗传多样性[7-8]方面,关于滇牡丹的分子生物学研究的报道较少。目前将分子生物学技术应用于植物基因功能的研究较为普遍,而研究植物生长发育过程中关键基因的功能是开发利用这些基因的前提。功能基因表达量及表达模式是确定基因功能的重要指标,内参基因是检测基因表达量的必要参照,在检测目标基因表达水平变化中起到校正作用,筛选合适的内参基因是研究基因表达的关键,能够减少实验误差,提高结果可靠性[9]。因此,筛选相对稳定的内参是研究基因表达分析的前提[10]。

实时荧光定量PCR技术具有准确性强、操作简单、结果可靠且成本低廉的特点。目前已经被广泛应用于分子生物学研究的多个领域。……

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