桂绍涛，赵 晖，熊 磊，罗 韬，雷 银，吴汶钊

外泌体是由机体活细胞通过内吞-融合-外排等生物学机制产生的纳米级囊泡，通过后期向内出芽形成多囊泡体，再通过多囊泡体与质膜融合释放至细胞外[1]，具有双层脂质膜结构，直径30～150 nm[2-3]，甚至可达200 nm[4]。外泌体首次于1983年由Johnstone在羊的成熟红细胞中发现，其在透射电子显微镜下常表现为杯状或双凹碟状，密度在蔗糖浓度梯度及碘二甲醇浓度梯度中分别为1.10～1.21 g/ml和1.10～1.12 g/ml[5-6]。外泌体表面分子通过囊泡黏附至受体细胞表面的脂质和配体，使整个囊泡内化到受体细胞，外泌体膜与受体细胞的质膜融合，从而促进与其他细胞的相互作用[7]。存在于体液中的外泌体在细胞信息交换中起重要作用，其与受体细胞之间存在3种作用机制[8]：①外泌体与受体细胞融合，并将其内容物传送至细胞质溶胶中[9]；②外泌体的跨膜蛋白可直接与靶细胞的信号受体相互作用[10]；③外泌体被内化到受体细胞并出现下列情况，即部分被吞噬的外泌体可以合并形成内体并经历转胞吞作用将外泌体再次释放至邻近细胞，而部分被吞噬的外泌体形成的内体可成熟为溶酶体并降解[11-12]。本文以女性生殖道外泌体在精子成熟与胚胎发育中的研究进展进行综述。

1 女性生殖道外泌体的分离与鉴定

选择分离和纯化的具体方法应考虑样品来源、体积、纯度、完整性、后续分析所需的外泌体及可用的仪器和处理时间，目前常见的外泌体分离方法有离心法(如超速离心法、差速离心法、密度梯度离心法、蔗糖垫离心法)、超滤法(如凝胶渗透色谱法、尺寸排斥色谱法等[13])、沉淀法和免疫磁珠法等[14]。……